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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2016-12-27 16:55:03瀏覽次數(shù):152次
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人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
18566 NT-3 ELISA Kit 人神經(jīng)營養(yǎng)因子3 96T
18567 NGF(Human Nerve growth factor) ELISA kit 人的神經(jīng)生長因子 96T
18568 vaspin ELASA Kit 大鼠內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑 96T
18569 OFQ/N(Mouse orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit 小鼠孤腓肽 96T
18570 NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神經(jīng)生長因子-β 96T
18571 MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬細胞炎性蛋白3β 96T
18572 PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit 小鼠蛋白磷酸酶 96T
18573 BrdU ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷* 96T
18574 MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬細胞炎性蛋白3α 96T
18575 TGF Beta2 ELISA Kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2 96T
18576 TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧還蛋白還原酶 96T
18577 Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 小鼠硫氧化還原蛋白 96T
18578 MIP-1 Beta/CCL4(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Beta) ELISA kit 人巨噬細胞炎性蛋白1β 96T
18579 CYP2E1 ISA Kit 大鼠細胞色素P4502E1 96T
18580 Alpha1-MG ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白 96T
18581 MIP-1 Alpha/CCL3(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Alpha) ELISA kit 人巨噬細胞炎性蛋白1α 96T
18582 Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) ELISA Kit 小鼠膠原酶II 96T
18583 Collagenase I(Mouse Collagenase Type I) ELISA Kit 小鼠膠原酶I 96T
18584 MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) ELISA kit 人巨噬細胞來源的趨化因子 96T
18585 MCP-4/CCL13 ELISA Kit 大鼠單核細胞趨化蛋白4 96T
18586 PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α 96T
18587 M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬細胞集落刺激因子 96T
18588 P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠磷酸化蛋白激酶C 96T
18589 MIC-1 human ELISA kit 人巨噬細胞抑制因子-1 ELISA 試劑盒 96T
18590 MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白3 96T
18591 pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 小鼠磷酸化細胞外信號調(diào)節(jié)激酶 96T
18592 CAM ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)素 96T
18593 CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠鈣通道阻滯劑 96T
18594 Apo-E ELISA Kit 大鼠載脂蛋白E 96T
18595 MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白2 96T
18596 MCP-1/CCL2/MCAF(Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor) ELISA kit 人單核細胞趨化蛋白1 96T
18597 ALT/GPT(Mouse Alanine Aminotransferase) ELISA Kit 小鼠*轉(zhuǎn)氨酶/谷丙轉(zhuǎn)氨酶 96T
18598 omentin ELISA Kit 大鼠網(wǎng)膜素 96T
18599 BMPs(Mouse bone morphogenetic proteins) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白 96T
18600 Human L-Selectin ELISA kit 人L選擇素 96T
18601 OFQ/N ELISA Kit 大鼠孤腓肽 96T
18602 PP ELISA Kit 大鼠蛋白磷酸酶 96T
18603 RBP-4(Mouse Retinol-binding protein 4) ELISA Kit 小鼠*結(jié)合蛋白4 96T
18604 IL-9(Human Interleukin 9) ELISA KIT 人白介素9 96T
18605 IL-8/CXCL8(Human Interleukin 8) ELISA KIT 人白介素8 96T
18606 6-keto-PGF1a(Mouse 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素F1a 96T
18607 TrxR ELISA Kit 大鼠硫氧還蛋白還原酶 96T
18608 Trx ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白 96T
18609 Pentosidine(Mouse Pentosidine) ELISA Kit 小鼠戊糖素 96T
18610 IL-6(Human Interleukin 6) ELISA KIT 人白介素6 96T
18611 Collagenase II ELISA Kit 人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒大鼠膠原酶II 96T
18612 AGEs(Mouse advanced glycation end products) ELISA Kit 小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物 96T
18613 IL-5(Human Interleukin 5) ELISA KIT 人白介素-5 96T
18614 TREM-1 ELISA Kit 大鼠髓系細胞觸發(fā)受體-1 96T
18615 IL-4(Human Interleukin 4) ELISA KIT 人白介素4 96T
18616 NGAL(Mouse neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit 小鼠中性粒細胞明膠酶相關脂質(zhì)運載蛋白 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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