半乳糖凝集素3(Gal3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)室
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
18402 CXCL16(Human CXC-chemokine ligand 16) ELISA Kit 人CXC趨化因子配體16 96T
18403 BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子 96T
18404 RBP ELISA Kit 大鼠*結(jié)合蛋白 96T
18405 CXCR3(Human CXC-chemokine receptor 3) ELISA Kit 人CXC趨化因子受體3 96T
18406 IFI16/p16(Human interferon-inducible protein 16) ELISA Kit 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16 96T
18407 GNRHR-Ab ELISA Kit 大鼠*釋放激素受體抗體 96T
18408 AIF(Mouse apoptosis inducing factor) ELISA Kit 小鼠凋亡誘導(dǎo)因子 96T
18409 ALP(Mouse alkaline phosphatase) ELISA Kit 小鼠堿性磷酸酶 96T
18410 MBP ELISA Kit 大鼠主要堿性蛋白 96T
18411 SDF-1a/CXCL12(Human Stromal cell derived factor 1a) ELISA Kit 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a 96T
18412 ECP ELISA Kit 大鼠嗜酸性粒細(xì)胞陽離子蛋白 96T
18413 Lptn/LTN/XCL1(Human lymphotactin) ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞趨化因子 96T
18414 ANG-4(Mouse Angiopoietin 4) ELISA Kit 小鼠血管生成素4 96T
18415 CaN ELISA Kit 大鼠鈣調(diào)磷酸酶 96T
18416 BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ 96T
18417 IFN- Alpha(Human Interferon Alpha) ELISA Kit 人α干擾素 96T
18418 INHBP ELISA Kit 大鼠抑制素結(jié)合蛋白 96T
18419 MHC- III /H-2 III (Mouse major histocompatibility complex- III ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類 96T
18420 B7-2/sCD86(Human soluble Cluster of differentiation 86) ELISA Kit 人可溶性CD86 96T
18421 E-Cad(Mouse E-Cadherin) ELISA Kit 小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 96T
18422 IL-27(human Interleukin 27) ELISA Kit 人白介素27 96T
18423 TPO-Ab ELISA Kit 大鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體 96T
18424 IL-28(human Interleukin 28) ELISA Kit 人白介素28 96T
18425 IL-29(human Interleukin 29) ELISA Kit 人白介素29 96T
18426 CD30(Mouse Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 小鼠CD30分子 96T
18427 IL-23(Human Interleukin 23) ELISA Kit 人白介素23 96T
18428 AIF ELISA Kit 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子 96T
18429 dsDNA ELISA Kit 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體 96T
18430 MHC- II /H-2 II (Mouse major histocompatibility complex- II ) ELISA Kit 小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類 96T
18431 MIF(Human Macrophage Migration Inhibitory Factor) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子 96T
18432 TFPIHuman Tissue factor pathway inhibitor ELISA Kit 人組織因子途徑抑制物 96T
18433 sEPCR(Mouse soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 96T
18434 ALP ELISA Kit 大鼠堿性磷酸酶 96T
18435 ADAMTS13/vWF-cp ELISA Kit 大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶 96T
18436 MECF(ouse eosinophil chemotactic factor) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化因子 96T
18437 IP-10/CXCL10(Human interferon-inducible protein 10) ELISA Kit 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10 96T
18438 IL-1(Human Interleukin 1) ELISA Kit 人白介素1 96T
18439 ANG-4 ELISA Kit 大鼠血管生成素4 96T
18440 Eotaxin 1/CCL11(Mouse Eotaxin 1) ELISA Kit 小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白 96T
18441 IL-17(Human Interleukin 17) ELISA Kit 人白介素17 96T
18442 E-Selectin/CD62E(Mouse E-Selectin) ELISA kit 小鼠E選擇素 96T
18443 LBP ELISA Kit 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白 96T
18444 IL-1 Beta(Human Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 人白介素1β (IL-1B) 96T
18445 FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit 小鼠凋亡相關(guān)因子 96T
18446 ADH ELISA Kit 大鼠乙醇脫氫酶 96T
18447 T 睪酮 96T
18448 E2 雌二醇 96T
18449 ET3 游離三碘甲狀腺原氨酸T3 96T
18450 ALDH ELISA Kit 大鼠乙醛脫氫酶 96T
18451 EGF(Human Epidermal growth factor) ELISA Kit 人表皮生長因子 96T
18452 Mouse Slit2 ELISA Kit 人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 小鼠Slit2 96T
18453 bFGF(Human basic fibroblast growth factor) ELISA Kit 人堿性成纖維細(xì)胞生長因子 96T
18454 sCD14 ELISA Kit 大鼠可溶性CD14 96T
18455 A Beta1-42(Mouse amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人白介素2(IL-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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