人晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)
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人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
18348 Plant Vitamin B6,VB6 ELISA Kit 植物*6 96T
18349 MMP-1 (Rabbit matrix metalloproteinase 1) ELISA Kit 兔基質(zhì)金屬蛋白酶1 96T
18350 BMP-2(Mouse Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白2 96T
18351 HSP47 ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白47 96T
18352 Plant 25-Dihydroxy vitamin D3,HVD3 ELISA Kit 植物25羥基*3 96T
18353 8-epi-PGF2 Alpha (Rabbit 8-epi-prostaglandin F2alpha) ELISA Kit 兔8-異構(gòu)前列腺素 96T
18354 BMP-4(Mouse Bone morphogenetic protein 4) ELISA Kit 小鼠骨成型蛋白4 96T
18355 GC ELISA Kit 大鼠內(nèi)源性糖皮質(zhì)激素 96T
18356 IAP(Human inhibitor of apoptosis) ELISA Kit 人細(xì)胞凋亡抑制因子 96T
18357 CS ELISA Kit 大鼠檸檬酸合酶 96T
18358 PF-4/CXCL4 (Rabbit Plaet Factor 4) ELISA Kit 兔子血小板因子4 96T
18359 IGFBP-6(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6) ELISA kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6 96T
18360 Plant Human Vitamin C,VC ELISA Kit 植物* 96T
18361 CSF(Human colony-stimulating factor) ELISA Kit 人集落刺激因子 96T
18362 MIGF/CXCL9(Human monocyte interferon gamma inducing factor) ELISA Kit 人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子 96T
18363 MIP-1 Delta(Mouse Macrophage Inflammatory Protein 1 Delta) ELISA kit 小鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白1δ 96T
18364 L-LDH ELISA Kit 大鼠L-鼠乳酸脫氫酶 96T
18365 Beta-TG (Rabbit Beta-Thromboglobulin) ELISA Kit 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 96T
18366 Alpha-bungarotoxin, Alpha-BGT ELISA Kit α-銀環(huán)蛇毒素 96T
18367 Bacillus thuringiensis,BT ELISA Kit 蘇云金芽孢桿菌蛋白 96T
18368 ACS ELISA Kit 大鼠脂酰*合成酶 96T
18369 Obestatin (Human Ghrelin/GHRP) ELISA Kit 人肥胖抑制素ELISA試劑盒 96T
18370 PARC(Mouse pulmonary activation regulated chemokine) ELISA Kit 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子 96T
18371 NE (Rabbit neutrophil elastase) ELISA Kit 兔子中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶 96T
18372 C3a (Rabbit Complement fragment 3a) ELISA Kit 兔子補(bǔ)體片斷3a 96T
18373 LZM(Mouse Lysozyme) ELISA Kit 小鼠* 96T
18374 CDl4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD14分子 96T
18375 CACT ELISA Kit 大鼠肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶 96T
18376 AIF(Human apoptosis inducing factor) ELISA Kit 人凋亡誘導(dǎo)因子 96T
18377 MMP-3 (Rabbit matrix metalloproteinase 3) ELISA Kit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶3 96T
18378 pACCase ELISA Kit 大鼠磷酸化乙酰*羧化酶 96T
18379 sCD30(Mouse soluble cluster of differentiation 30) Elisa Kit 小鼠可溶性CD30 96T
18380 TRAP-5b ELISA Kit(Rabbit) 兔酒石酸磷酸酶TRAP-5b ELISA試劑盒 96T
18381 sMHC-2(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈 96T
18382 MT ELISA Kit 大鼠金屬硫蛋白 96
18383 sCD40L (Rabbit differentiation 40 ligand) ELISA Kit 兔子可溶性CD40配體 96T
18384 LCA/CD45(Human leukocyte common antigen) ELISA Kit 人白細(xì)胞共同抗原 96T
18385 MHC I /RLA I (Rabbit major histocompatibility complex I ) ELISA Kit 兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類 96T
18386 sMHC-1(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1 96T
18387 cTnT ELISA Kit 大鼠心肌特異性肌鈣蛋白T 96T
18388 CD4(Human cluster Of differentiation) ELISA Kit 人CD4分子 96T
18389 BLAP ELISA Kit(Rabbit) 兔骨堿性磷酸酶 ELISA 試劑盒 96T
18390 AChE ELISA Kit 大鼠乙酰*酯酶 96T
18391 P-cad(Human Placenta Cadherin) ELISA Kit 人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白 96T
18392 MUC5AC(Mouse Mucin-5 subtype AC) ELISA Kit 小鼠粘蛋白/粘液素5AC 96T
18393 BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein)ELISA Kit 兔骨鈣素 ELISA試劑盒 96T
18394 KGF(Human Keratinocyte Growth Factor) ELISA Kit 人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子 96T
18395 ACE(Mouse Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 96T
18396 CDT ELISA Kit 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白 96T
18397 PDGF-BB(Human Plaet-Derived Growth Factor-BB) ELISA kit 人血小板衍生生長(zhǎng)因子BB 人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒96T
18398 ANG- II (Mouse angiotension II ) ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ 96T
18399 TBA ELISA Kit 大鼠總膽汁酸 96T
18400 BMG/ Beta2-MG ELISA Kit 大鼠β2微球蛋白 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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