小鼠長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP)ELISA試劑盒
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人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
18293 VEGFR-2/sFLK-1(Human soluble vascular endothelial growth factor receptor-2) ELISA Kit 人可溶性血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2 96T
18294 Pisum sativum agglutinin,PSA ELISA Kit 豌豆凝集素 96T
18295 Rat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit 小鼠孕酮受體 96T
18296 Dolichos bifows agglutinin,DBA ELISA Kit 雙花扁豆凝集素 96T
18297 TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin) ELISA Kit 人胸腺基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素 96T
18298 TARC/CCL17 ELISA Kit 大鼠胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子 96T
18299 sEPCR (Rabbit soluble endothelial protein C receptor) ELISA Kit 兔子可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體 96T
18300 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白6 96T
18301 CH ELISA Kit 大鼠* 96T
18302 Lp- Alpha (Rabbit lipoprotein Alpha) ELISA Kit 兔脂蛋白α 96T
18303 PF/PFP(Human Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 人穿孔素/成孔蛋白 96T
18304 Plant calmodulin,CAM ELISA Kit 植物鈣調(diào)素 96T
18305 Mouse pulmonary activation regulated chemokine,PARC ELISA Kit 小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子 96T
18306 PTN(Human pleiotrophin) ELISA Kit 人多效生長(zhǎng)因子 96T
18307 Apo-E (Rabbit Apolipoprotein E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E 96T
18308 TG mouse ELISA Kit 小鼠甘油三酯 96T
18309 Plant hormone abscisic acid,ABA ELISA Kit 植物激素脫落酸 96T
18310 Mouse Lysozyme,LZM ELISA Kit 小鼠* 96T
18311 valosin-containing protein kit/VCP (human) 人含纈酪肽蛋白 96T
18312 sCD28(human soluble cluster of differentiation 28) ELISA Kit 人可溶性CD28 96T
18313 Mouse Beta-catenin, Beta-cat ELISA Kit 小鼠β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白 96T
18314 LDL ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白 96T
18315 Plant Vitamin K1,VK1 ELISA Kit 植物*1 96T
18316 apo-B100 (Rabbit apoprotein B100) ELISA Kit 兔載脂蛋白B100 96T
18317 Plant Vitamin B12,VB12 ELISA Kit 植物*12 96T
18318 HDL ISA Kit 大鼠高密度脂蛋白 96T
18319 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 96T
18320 Human lymphocyte factor ELISA Kit 人淋巴細(xì)胞因子 96T
18321 TGF Beta2 (Rabbit transforming growth factor Beta2) ELISA Kit 兔轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2 96T
18322 NOS (Rabbit nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔一氧化氮合成酶 96T
18323 Plant Vitamin A,VA ELISA Kit 植物* 96T
18324 Mouse Angiotensin converting enzyme,ACE ELISA Kit 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 96T
18325 TARC/CCL17(Human thymus activation regulated chemokine) ELISA Kit 人胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子 96T
18326 PGR ELISA Kit 大鼠孕酮受體 96T
18327 Mouse angiotension II ,ANG- II ELISA Kit 小鼠血管緊張素Ⅱ 96T
18328 Plant Vitamin E,VE EELISA Kit 植物* 96T
18329 eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit 兔內(nèi)皮型一氧化氮合成酶 96T
18330 NCAM-L1/CD171(Human Neural cell adhesion molecule ligand 1) ELISA Kit 人神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1 96T
18331 ACE II ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ轉(zhuǎn)化酶 96T
18332 ACE I ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶 96T
18333 PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA Kit 兔*型纖溶酶原激活物受體 96T
18334 Plant Vitamin D2,VD2 ELISA Kit 植物*2 96T
18335 Mouse keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 小鼠角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白 96T
18336 CVNPF(Human Cobra venom neuronal protective factor) ELISA Kit 人神經(jīng)保護(hù)因子 96T
18337 sTNF AlphaR(Human soluble Tumor Necrosis Factor Alphareceptor) ELISA Kit 人可溶性腫瘤壞死因子α受體 96T
18338 ACV-A (Mouse Activin A) ELISA Kit 小鼠活化素A 96T
18339 uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator) ELISA Kit 兔*型纖溶酶原激活物 96T
18340 GnRHR ELISA Kit 大鼠*釋放激素受體 96T
18341 Plant Vitamin D3,VD3 ELISA kit 植物*3 96T
18342 sCKR(Human soluble cytokine receptor) ELISA Kit 人可溶性細(xì)胞因子受體 96T
18343 AMPK ELISA Kit 人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒大鼠磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
18344 hs-CRP (Rabbit high sensitivity C-Reactive Protein) ELISA Kit 兔超敏C反應(yīng)蛋白 96T
18345 BDNF(Mouse Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 96T
18346 Plant Vitamin D,VD ELISA Kit 植物* 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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