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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-22 10:58:14瀏覽次數(shù):160次
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人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
17969 L-Selectin/CD62L ELISA Kit 小鼠L選擇素 96T
17970 Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit 豚鼠卵清蛋白特異性IgG 96T
17971 ACV-RAb(Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb )ELISA Kit 大鼠活化素A受體抗體 96T
17972 IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 兔白介素1β 96T
17973 PCDH1( Human protocadherin 1,PCDH1 )ELISA Kit 人原鈣黏素1 96T
17974 CK-MB(Rat Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit 大鼠肌酸激酶同工酶MB ELISA Kit 96T
17975 SCT(Salmon calcitonin) ELISA Kit * 96T
17976 IL-6 (Rabbit Interleukin 6) ELISA Kit 兔白介素6 96T
17977 Guinea pig interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 豚鼠白介素4 96T
17978 NGB(Rat Neuroglobin,NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白 96T
17979 PCDH1(Human Interleukin-2 receptor,IL-2R) ELISA Kit 人原鈣黏素1 96T
17980 Mouse mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit 小鼠粘蛋白/粘液素5B 96T
17981 IL-10 (Rabbit Interleukin 10) ELISA Kit 兔白介素10 96T
17982 CTACK/CCL27(Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK) ELISA Kit 人皮膚T細(xì)胞虜獲趨化因子 96T
17983 Guinea pig Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit 豚鼠免疫球蛋白G 96T
17984 TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成素 96T
17985 Mouse pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit 小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 96T
17986 IFN- Gamma ELISA Kit(mouse) 小鼠γ干擾素 96T
17987 FSH Poultry ELISA Kit FSH 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 96T
17988 LH Poultry ELISA Kit LH 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 96T
17989 PRL Poultry ELISA Kit PRL 禽類酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒 96T
17990 E2 ELISA KIT 魚雌二醇 96T
17991 Mouse single stranded DNA Antibody,ssDNA ELISA Kit 小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 96T
17992 BRAK/CXCL14(Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK) ELISA Kit 人胸腎表達(dá)趨化因子 96T
17993 (BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit 大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白 96T
17994 TNF- Alpha (Rabbit Tumor necrosis factor Alpha) ELISA Kit 兔子腫瘤壞死因子α 96T
17995 Mouse phosphatidylserine,PS ELISA Kit 小鼠磷脂酰* 96T
17996 TGF- Beta (Rabbit Transforming Growth factor Beta) ELISA Kit 兔子轉(zhuǎn)化生長因子β 96T
17997 ACTH ELISA Kit 魚促腎上腺皮質(zhì)激素 96T
17998 sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶性凋亡相關(guān)因子 96T
17999 BLC-1/CXCL13(Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1) ELISA Kit 人B-淋巴細(xì)胞趨化因子 96T
18000 CTAP III (Human connective tissue-activating peptide III ,CTAP III ) ELISA Kit 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ 96T
18001 Annexin A2 human c ELISA Kit 人膜粘連蛋白 Ⅱ ELISA 試劑盒 96T
18002 Mouse choline phosphoglyceride,PC/CPG ELISA Kit 小鼠*磷酸甘油酯 96T
18003 ChAT (Rat Choline Acetyltransferase ) ELISA Kit 大鼠*乙酰轉(zhuǎn)移酶 96T
18004 bFGF (Rabbit basic fibroblast growth factor) ELISA Kit 兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子 96T
18005 PGE2 (Rabbit Prostaglandin E2) ELISA Kit 兔子前列腺素E2 96T
18006 FSH ELISA Kit 魚促卵泡素 96T
18007 IL-7(Rat Interleukin-7) ELISA kit 大鼠白介素7 96T
18008 Mouse Beta-Defensins, Beta-DF ELISA Kit 小鼠β-防御素 96T
18009 M-CSFR(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor Receptor,M-CSFR) ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體 96T
18010 TUNEL 細(xì)胞凋亡原位檢測試劑盒(我公司提供代測服務(wù)) 10人份
18011 TUNEL 細(xì)胞凋亡原位檢測試劑盒(我公司提供代測服務(wù)) 50人份
18012 STK(Reat serine/threonine protein kinase,STK) ELISA Kit 大鼠*/*蛋白磷酸酶 96T
18013 5-HT (Rabbit 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit 兔子5羥色胺 96T
18014 LH ELISA Kit 魚促黃體激素 96T
18015 Fc AlphaR I /CD89(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin A,Fc AlphaR I ) ELISA Kit *A Fc段受體Ⅰ 96T
18016 Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type I collagen, I CTP ELISA Kit 小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽 96T
18017 Beta-EP (Rabbit Beta-Endorphin) ELISA Kit 兔子β內(nèi)啡肽 96T
18018 Mouse neurofilament protein,NF ELISA Kit 小鼠神經(jīng)絲蛋白 96T
18019 AMPK ELISA Kit 魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
18020 RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細(xì)胞抗體 96T
18021 Fc Epsilon R II /CD23(Human Receptor II for the Fc region of immunoglobulin E,Fc Epsilon R II ) ELISA Kit *E Fc段受體Ⅱ 96T
18022 Fc GammaR III /CD16(Human Receptor III for the Fc region of immunoglobulin G,Fc GammaR III ) ELISA Kit *G Fc段受體Ⅲ 96T
18023 PV ELISA Kit 魚卵黃高磷蛋白 96T
18024 NF-KapB p65 (Rabbit nuclear factor-KapB p65) ELISA Kit 兔核因子κB亞基p65親和肽 96T
18025 Mouse small nuclear ribonucleoprotein,snRNP/Sm ELISA Kit 小鼠抗小核糖核蛋白/Sm抗體 人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒96T
18026 乙型肝炎二對半全套 96T
18027 CD3(Rat Cluster of differentiation 3,CD3) ELISA Kit 大鼠CD3分子 96T
18028 乙型肝炎二對半全套(立可讀) 96T
18029 HBsAg 乙型肝炎表面抗原 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人L選擇素(L-Selectin/CD62L)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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