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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-27 16:41:57瀏覽次數(shù):158次
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人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
17936 酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Zymogen Granule Protein 16 Homolog B (ZG16B) 96T Homo sapiens (Human)
17937 X-射線修復(fù)交叉互補蛋白6(XRCC6)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6) 96T Homo sapiens (Human)
17938 X-射線修復(fù)交叉互補蛋白6(XRCC6)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for X-Ray Repair Cross Complementing 6 (XRCC6) 96T Mus musculus (Mouse)
17939 C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group C (XPC) 96T Homo sapiens (Human)
17940 G組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPG)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group G (XPG) 96T Homo sapiens (Human)
17941 X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1) 96T Homo sapiens (Human)
17942 X-框結(jié)合蛋白1(XBP1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for X-Box Binding Protein 1 (XBP1) 96T Mus musculus (Mouse)
17943 X-連鎖凋亡蛋白抑制因子(XIAP)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for X-Linked Inhibitor Of Apoptosis Protein (XIAP) 96T Homo sapiens (Human)
17944 黃嘌呤脫氫酶(XDH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17945 黃嘌呤脫氫酶(XDH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH) 96T Homo sapiens (Human)
17946 黃嘌呤脫氫酶(XDH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH) 96T Mus musculus (Mouse)
17947 WNT1誘導(dǎo)信號通道蛋白2(WISP2)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for WNT1 Inducible Signaling Pathway Protein 2 (WISP2) 96T Homo sapiens (Human)
17948 WNT1誘導(dǎo)信號通道蛋白1(WISP1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for WNT1 Inducible Signaling Pathway Protein 1 (WISP1) 96T Homo sapiens (Human)
17949 WNT1誘導(dǎo)信號通道蛋白1(WISP1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for WNT1 Inducible Signaling Pathway Protein 1 (WISP1) 96T Mus musculus (Mouse)
17950 含鋅飄帶域蛋白1(ZNRD1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Zinc Ribbon Domain Containing Protein 1 (ZNRD1) 96T Homo sapiens (Human)
17951 鋅指同源框蛋白1B(ZFHX1B)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Zinc Finger Homeobox Protein 1B (ZFHX1B) 96T Mus musculus (Mouse)
17952 白介素6(IL6)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 6 (IL6) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
17953 黑素皮質(zhì)激素5受體(MC5R)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Melanocortin 5 Receptor (MC5R) 96T Homo sapiens (Human)
17954 血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Serum Amyloid A (SAA) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
17955 RAS癌基因家族成員RAB1A(RAB1A)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for RAB1A, Member RAS Oncogene Family (RAB1A) 96T Homo sapiens (Human)
17956 含*豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Leucine Rich Repeat Containing Protein 3C (LRRC3C) 96T Mus musculus (Mouse)
17957 纖維蛋白肽A(FPA)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fibrinopeptide A (FPA) 96T Homo sapiens (Human)
17958 含*豐富重復(fù)蛋白3C(LRRC3C)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Leucine Rich Repeat Containing Protein 3C (LRRC3C) 96T Homo sapiens (Human)
17959 泛素結(jié)合酶E2C結(jié)合蛋白E2L3(UBE2L3)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Conjugating Enzyme E2L3 (UBE2L3) 96T Homo sapiens (Human)
17960 蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a) 96T Mus musculus (Mouse)
17961 蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17962 蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17963 *羥化酶(TH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Tyrosine Hydroxylase (TH) 96T Rattus norvegicus人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒 (Rat)
17964 *乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17965 RAS癌基因家族成員RAB5A(RAB5A)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for RAB5A, Member RAS Oncogene Family (RAB5A) 96T Mus musculus (Mouse)
17966 甲狀旁腺激素(PTH)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Parathyroid Hormone (PTH) 96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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