人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

17682 對(duì)氧磷酶1(PON1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Paraoxonase 1 (PON1) 96T Homo sapiens (Human)
17683 D-二聚體(D2D)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for D-Dimer (D2D) 96T Mus musculus (Mouse)
17684 載脂蛋白A1(APOA1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1) 96T Mus musculus (Mouse)
17685 肌原纖蛋白1(FBN1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fibrillin 1 (FBN1) 96T Homo sapiens (Human)
17686 粘蛋白5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Mucin 5 Subtype B (MUC5B) 96T Homo sapiens (Human)
17687 Toll樣受體4(TLR4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4) 96T Mus musculus (Mouse)
17688 血清淀粉樣P物質(zhì)(SAP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Serum Amyloid P Component (SAP) 96T Homo sapiens (Human)
17689 巨噬細(xì)胞清道夫受體1(MSR1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Macrophage Scavenger Receptor 1 (MSR1) 96T Homo sapiens (Human)
17690 主要堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Major Basic Protein (MBP) 96T Mus musculus (Mouse)
17691 黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM) 96T Mus musculus (Mouse)
17692 載脂蛋白A4(APOA4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 96T Homo sapiens (Human)
17693 上皮型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP5)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Fatty Acid Binding Protein 5, Epidermal (FABP5) 96T Homo sapiens (Human)
17694 整合素β6(ITGβ6)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Integrin Beta 6 (ITGb6) 96T Homo sapiens (Human)
17695 膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Annexin A1 (ANXA1) 96T Homo sapiens (Human)
17696 嘌呤能受體P2X7(P2RX7)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Purinergic Receptor P2X, Ligand Gated Ion Channel 7 (P2RX7) 96T Homo sapiens (Human)
17697 絲聚蛋白(FLG)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Filaggrin (FLG) 96T Homo sapiens (Human)
17698 HtrA*肽酶1(HTRA1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for HtrA Serine Peptidase 1 (HTRA1) 96T Homo sapiens (Human)
17699 胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17700 谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Alanine Aminotransferase (ALT) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17701 乳過氧化物酶(LPO)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Lactoperoxidase (LPO) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17702 β-血小板球蛋白(βTG)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Beta-Thromboglobulin (bTG) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17703 紅細(xì)胞分化去核相關(guān)因子1(EDDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythroid Differentiation And Denucleation Factor 1 (EDDF1) 96T Homo sapiens (Human)
17704 紅細(xì)胞分化去核相關(guān)因子1(EDDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythroid Differentiation And Denucleation Factor 1 (EDDF1) 96T Mus musculus (Mouse)
17705 紅細(xì)胞分化去核相關(guān)因子1(EDDF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythroid Differentiation And Denucleation Factor 1 (EDDF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17706 紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1(EDRF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythroid Differentiation Related Factor 1 (EDRF1) 96T Homo sapiens (Human)
17707 紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1(EDRF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythroid Differentiation Related Factor 1 (EDRF1) 96T Mus musculus (Mouse)
17708 紅細(xì)胞分化相關(guān)因子1(EDRF1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Erythroid Differentiation Related Factor 1 (EDRF1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17709 線粒體裂殖因子(MFF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Mitochondrial Fission Factor (MFF) 96T Homo sapiens (Human)
17710 線粒體裂殖因子(MFF)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Mitochondrial Fission Factor (MFF) 96T Mus musculus (Mouse)
17711 細(xì)胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白2樣蛋白(CKAP2L)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cytoskeleton Associated Protein 2 Like Protein (CKAP2L) 96T Homo sapiens人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒 (Human)
17712 細(xì)胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白2樣蛋白(CKAP2L)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cytoskeleton Associated Protein 2 Like Protein (CKAP2L) 96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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