人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

17618 干擾素誘導(dǎo)蛋白41(IFI41)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein 41, 30kDa (IFI41) 96T Mus musculus (Mouse)
17619 干擾素誘導(dǎo)蛋白41(IFI41)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein 41, 30kDa (IFI41) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17620 趨化因子C-C-基元受體樣蛋白1(CCRL1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1 (CCRL1) 96T Homo sapiens (Human)
17621 趨化因子C-C-基元受體樣蛋白1(CCRL1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1 (CCRL1) 96T Mus musculus (Mouse)
17622 趨化因子C-C-基元受體樣蛋白1(CCRL1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor Like Protein 1 (CCRL1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17623 細(xì)胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白4(CKAP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cytoskeleton Associated Protein 4 (CKAP4) 96T Homo sapiens (Human)
17624 細(xì)胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白4(CKAP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cytoskeleton Associated Protein 4 (CKAP4) 96T Mus musculus (Mouse)
17625 細(xì)胞骨架關(guān)聯(lián)蛋白4(CKAP4)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Cytoskeleton Associated Protein 4 (CKAP4) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17626 細(xì)胞附著蛋白交換因子相互作用蛋白1(IPCEF1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interaction Protein For Cytohesin Exchange Factors 1 (IPCEF1) 96T Homo sapiens (Human)
17627 細(xì)胞附著蛋白交換因子相互作用蛋白1(IPCEF1)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interaction Protein For Cytohesin Exchange Factors 1 (IPCEF1) 96T Mus musculus (Mouse)
17628 白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 27 Working Designation (IL27w) 96T Homo sapiens (Human)
17629 白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 27 Working Designation (IL27w) 96T Mus musculus (Mouse)
17630 白介素27w(IL27w)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 27 Working Designation (IL27w) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17631 粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF) 96T Canis familiaris; Canine (Dog)
17632 粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF) 96T Homo sapiens (Human)
17633 粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GMCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF) 96T Mus musculus (Mouse)
17634 肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17635 肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 96T Canis familiaris; Canine (Dog)
17636 肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 96T Mus musculus (Mouse)
17637 肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17638 肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Hepatocyte Growth Factor (HGF) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
17639 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
17640 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Canis familiaris; Canine (Dog)
17641 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Chicken (Gallus)
17642 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Cavia (Guinea pig )
17643 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
17644 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
17645 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 96T Rhesus monkey (Simian)
17646 粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF) 96T Homo sapiens (Human)
17647 粒細(xì)胞集落刺激因子人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒(GCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF) 96T Mus musculus (Mouse)
17648 粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF) 96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
更多人ELISA試劑盒產(chǎn)品