人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

17524 含跨膜Emp24蛋白運(yùn)輸域蛋白1(TMED1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transmembrane Emp24 Protein Transport Domain Containing Protein 1 (TMED1) 96T Homo sapiens (Human)
17525 含跨膜Emp24蛋白運(yùn)輸域蛋白1(TMED1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transmembrane Emp24 Protein Transport Domain Containing Protein 1 (TMED1) 96T Mus musculus (Mouse)
17526 含跨膜Emp24蛋白運(yùn)輸域蛋白1(TMED1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Transmembrane Emp24 Protein Transport Domain Containing Protein 1 (TMED1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17527 三角形四肽重復(fù)干擾素誘導(dǎo)蛋白1(IFIT1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 1 (IFIT1) 96T Homo sapiens (Human)
17528 三角形四肽重復(fù)干擾素誘導(dǎo)蛋白1(IFIT1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 1 (IFIT1) 96T Mus musculus (Mouse)
17529 三角形四肽重復(fù)干擾素誘導(dǎo)蛋白1(IFIT1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 1 (IFIT1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17530 三角形四肽重復(fù)干擾素誘導(dǎo)蛋白2(IFIT2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 2 (IFIT2) 96T Homo sapiens (Human)
17531 三角形四肽重復(fù)干擾素誘導(dǎo)蛋白2(IFIT2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 2 (IFIT2) 96T Mus musculus (Mouse)
17532 三角形四肽重復(fù)干擾素誘導(dǎo)蛋白2(IFIT2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Induced Protein With Tetratricopeptide Repeats 2 (IFIT2) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17533 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白1(IGF2BP1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 1 (IGF2BP1) 96T Homo sapiens (Human)
17534 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白1(IGF2BP1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 1 (IGF2BP1) 96T Mus musculus (Mouse)
17535 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白1(IGF2BP1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 1 (IGF2BP1) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17536 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 2 (IGF2BP2) 96T Homo sapiens (Human)
17537 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 2 (IGF2BP2) 96T Mus musculus (Mouse)
17538 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白2(IGF2BP2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 2 (IGF2BP2) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17539 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3) 96T Homo sapiens (Human)
17540 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3) 96T Mus musculus (Mouse)
17541 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17542 白介素1受體樣蛋白2(IL1RL2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Like Protein 2 (IL1RL2) 96T Homo sapiens (Human)
17543 白介素1受體樣蛋白2(IL1RL2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Like Protein 2 (IL1RL2) 96T Mus musculus (Mouse)
17544 白介素1受體樣蛋白2(IL1RL2)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Receptor Like Protein 2 (IL1RL2) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17545 Aristaless樣同源框蛋白4(ALX4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Aristaless Like Homeobox Protein 4 (ALX4) 96T Homo sapiens (Human)
17546 Aristaless樣同源框蛋白4(ALX4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Aristaless Like Homeobox Protein 4 (ALX4) 96T Mus musculus (Mouse)
17547 Aristaless樣同源框蛋白4(ALX4)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Aristaless Like Homeobox Protein 4 (ALX4) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17548 白介素1家族成員9(IL1F9)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 96T Homo sapiens (Human)
17549 白介素1家族成員9(IL1F9)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 96T Mus musculus (Mouse)
17550 白介素1家族成員9(IL1F9)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17551 泛素交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP) 96T Homo sapiens (Human)
17552 泛素交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP) 96T Mus musculus (Mouse)
17553 泛素交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)檢測(cè)試劑盒人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Ubiquitin Cross Reactive Protein (UCRP) 96T Rattus norvegicus (Rat)
17554 干擾素α誘導(dǎo)蛋白27樣蛋白1(IFI27L1)檢測(cè)試劑盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) CLIA Kit for Interferon Alpha Inducible Protein 27 Like Protein 1 (IFI27L1) 96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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