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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-15 14:25:22瀏覽次數(shù):170次
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人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
16654 Slingshot同源物2(SSH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slingshot Homolog 2 (SSH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16655 UDP葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶2家族多肽B7(UGT2B7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for UDP Glucuronosyltransferase 2 Family, Polypeptide B7 (UGT2B7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16656 復(fù)制蛋白A1(RPA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Replication Protein A1 (RPA1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16657 Discs大同源物3(DLG3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Discs, Large Homolog 3 (DLG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16658 賴氨酸特異性去甲基化酶4A(KDM4A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysine Specific Demethylase 4A (KDM4A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16659 復(fù)制蛋白A1(RPA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Replication Protein A1 (RPA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16660 蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16661 興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白5(EAAT5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 5 (EAAT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16662 興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運蛋白4(EAAT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 4 (EAAT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16663 色胺酸羥化酶1(TPH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tryptophan Hydroxylase 1 (TPH1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16664 含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chaperonin Containing TCP1, Subunit 2 (CCT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16665 含TCP1伴侶蛋白亞基2(CCT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chaperonin Containing TCP1, Subunit 2 (CCT2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16666 卷曲域錨蛋白重復(fù)序列??葡萄膜自身抗原(UACA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Uveal Autoantigen With Coiled Coil Domains And Ankyrin Repeats (UACA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16667 節(jié)律晝夜蛋白2(PER2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Period Circadian Protein 2 (PER2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16668 CD27結(jié)合蛋白(CD27BP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CD27 Binding Protein (CD27BP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16669 Zeste 12同源物1抑制因子2(SUZ12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suppressor Of Zeste 12 Homolog (SUZ12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16670 YY1轉(zhuǎn)錄因子(YY1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for YY1 Transcription Factor (YY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16671 硬脂酰*去飽和酶(SCD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16672 核糖體蛋白L13A(RPL13A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribosomal Protein L13A (RPL13A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16673 活性氧物種調(diào)節(jié)因子1(ROMO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reactive Oxygen Species Modulator 1 (ROMO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16674 腦蛋白44樣蛋白(BRP44L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Brain Protein 44 Like Protein(BRP44L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16675 γ-分泌激活蛋白(γSAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Gamma-Secretase Activating Protein (gSAP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16676 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amyloid Beta Precursor Like Protein 1 (APLP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16677 免疫球蛋白G2α(IgG2α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin G2a (IgG2a) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16678 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1(APLP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amyloid Beta Precursor Like Protein 1 (APLP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16679 沉默調(diào)節(jié)蛋白6(SIRT6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sirtuin 6 (SIRT6) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16680 N-甲基-D-天氡氨酸離子能*受體2D(GRIN2D)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2D (GRIN2D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16681 硬脂酰*去飽和酶(SCD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16682 17-β-羥基類固醇脫氫酶10(HSD17β10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 10 (HSD17b10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16683 肌鈣蛋白I(TNI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin I (TNI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16684 周期素依賴性激酶5(CDK5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin Dependent Kinase 5 (CDK5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16685 補體1q(C1q)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement 1q (C1q) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16686 N-甲基-D-天氡氨酸離子能*受體2C(GRIN2C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2C (GRIN2C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16687 N-甲基-D-天氡氨酸離子能*受體2B(GRIN2B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2B (GRIN2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16688 鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶2(SGPP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingosine-1-Phosphate Phosphatase 2 (SGPP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16689 *半*連接酶(GCLM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16690 鞘氨醇-1-磷酸磷酸酶1(SGPP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sphingosine-1-Phosphate Phosphatase 1 (SGPP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16691 骨涎蛋白(BSP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Sialoprotein (BSP) 48T/96T Mus musculus人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒 (Mouse)
16692 鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caldesmon (CALD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16693 套膜蛋白(iNV)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Involucrin (iNV) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人B細胞生長因子(BCGF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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