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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
16571 AMPA離子能*受體4(GRIA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 4 (GRIA4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16572 組蛋白脫乙酰基酶4(HDAC4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16573 線粒體解偶聯蛋白1(UCP1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Uncoupling Protein 1, Mitochondrial (UCP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16574 易位關聯膜蛋白1(TRAM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Translocation Associated Membrane Protein 1 (TRAM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16575 分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secretogranin II (SCG2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16576 腺苷A1受體(ADORA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenosine A1 Receptor (ADORA1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16577 黑素瘤缺乏因子1(AIM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Absent In Melanoma 1 (AIM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16578 *酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NAADP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nicotinic Acid Adenine Dinucleotide Phosphate (NAADP) 48T/96T General
16579 銅離子轉運ATP酶β肽(ATP7β)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Cu++ Transporting Beta Polypeptide (ATP7b) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16580 TNF受體關聯因子3(TRAF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 3 (TRAF3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16581 TNF受體關聯因子5(TRAF5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TNF Receptor Associated Factor 5 (TRAF5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16582 Toll樣受體銜接分子1(TICAM1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor Adaptor Molecule 1 (TICAM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16583 TANK結合激酶1(TBK1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for TANK Binding Kinase 1 (TBK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16584 V-Maf肌肉腱膜纖維肉瘤癌基因同源物(MAF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for V-Maf Musculoaponeurotic Fibrosarcoma Oncogene Homolog (MAF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16585 V-Ki-Ras2 Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for V-Ki-Ras2 Kirsten Rat Sarcoma Viral Oncogene Homolog (KRAS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16586 白介素18結合蛋白(IL18BP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 Binding Protein (IL18BP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16587 早期內體抗原1(EEA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Early Endosome Antigen 1 (EEA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16588 多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸轉移酶1(DPAGT1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dolichyl Phosphate-N-Acetylglucosaminephosphotransferase 1 (DPAGT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16589 DNA損傷誘導轉錄因子3(DDIT3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for DNA Damage Inducible Transcript 3 (DDIT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16590 H2A組蛋白家族成員V(H2AFV)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for H2A Histone Family, Member V (H2AFV) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16591 B-細胞κ-輕肽基因增強子抑制因子激酶β(IκBKβ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibitor Of Kappa-Light Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase Beta (IkBKb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16592 Snail同源物1(SNAI1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Snail Homolog 1 (SNAI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16593 神經調節(jié)素4(NRG4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuregulin 4 (NRG4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16594 含Kazal型*蛋白酶抑制劑域蛋白1(KAZALD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kazal Type Serine Protease Inhibitor Domain Containing Protein 1 (KAZALD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16595 棘皮動物微管關聯蛋白樣蛋白2(EML2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Echinoderm Microtubule Associated Protein Like Protein 2 (EML2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16596 血管緊張素1-7(Ang1-7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16597 血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin II (AngII) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
16598 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
16599 吻素受體(KISS1R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kisspeptin Receptor (KISS1R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16600 吻素受體(KISS1R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kisspeptin Receptor (KISS1R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16601 G蛋白偶聯雌激素受體1(GPER)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Protein Coupled Estrogen Receptor 1 (GPER) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16602 嘌呤能受體P2Y12(P2RY12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Purinergic Receptor P2Y, G Protein Coupled 12 (P2RY12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16603 微管關聯蛋白1輕鏈3α(MAP1LC3α)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microtubule Associated Protein 1 Light Chain 3 Alpha (MAP1LC3a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16604 類固醇合成急性調節(jié)蛋白(STAR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Steroidogenic Acute Regulatory Protein (STAR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16605 G蛋白偶聯受體78(GPR78)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor 78 (GPR78) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16606 *(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anti Mullerian Hormone (AMH) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16607 肌鈣蛋白I(TNI)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin I (TNI) 48T/96T General
16608 α-內啡肽(αEP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Endorphin (aEP) 48T/96T Mus musculus人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒 (Mouse)
16609 抑制素B(INHB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibin B (INHB) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16610 生長激素受體(GHR)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Hormone Receptor (GHR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人巨噬細胞趨化因子(MCF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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