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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
16408 多聚ADP核糖聚合酶(PARP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Poly ADP Ribose Polymerase (PARP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16409 FK506結(jié)合蛋白12雷帕霉素關(guān)聯(lián)蛋白(FRAP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for FK506 Binding Protein 12 Rapamycin Associated Protein (FRAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16410 E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16411 E1A結(jié)合蛋白P300(EP300)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for E1A Binding Protein P300 (EP300) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16412 蛋白激酶Bα(PKBα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase B Alpha (PKBa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16413 氨乙酰丙酸δ脫水酶(ALAD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aminolevulinate Delta Dehydratase (ALAD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16414 F-框蛋白32(FBXO32)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for F-Box Protein 32 (FBXO32) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16415 多胺氧化酶(PAOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polyamine Oxidase (PAOX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16416 β-1,4-N-乙酰半乳糖胺基轉(zhuǎn)移酶2(β4GALNT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Beta-1,4-N-Acetyl Galactosaminyl Transferase 2 (b4GALNT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16417 V-Erb B2紅白血病病毒癌基因同源物3(ErbB3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for V-Erb B2 Erythroblastic Leukemia Viral Oncogene Homolog 3 (ErbB3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16418 CCAAT增強(qiáng)子結(jié)合蛋白β(CEBPβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for CCAAT/Enhancer Binding Protein Beta (CEBPb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16419 CD109分子(CD109)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 109 (CD109) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16420 Twist轉(zhuǎn)錄因子(TWIST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Twist Transcription Factor (TWIST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16421 FK506結(jié)合蛋白1A(FKBP1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for FK506 Binding Protein 1A (FKBP1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16422 興奮性氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(EAAT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Excitatory Amino Acid Transporter 2 (EAAT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16423 蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16424 AN1-型鋅指域蛋白6(ZFAND6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Zinc Finger, AN1-Type Domain Protein 6 (ZFAND6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16425 類*(TPS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tryptase (TPS) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
16426 煙堿型*受體β3(CHRNβ3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Beta 3 (CHRNb3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16427 靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16428 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體3(FGFR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 3 (FGFR3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16429 腺苷A2a受體(ADORA2a)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adenosine A2a Receptor (ADORA2a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16430 甘露糖磷酸異構(gòu)酶(MPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mannose Phosphate Isomerase (MPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16431 趨化因子C-C-基元配體1(CCL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Ligand 1 (CCL1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16432 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16433 淋巴細(xì)胞功能關(guān)聯(lián)抗原1α(LFA1α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lymphocyte Function Associated Antigen 1 Alpha (LFA1a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16434 含纈酪肽蛋白(VCP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Valosin Containing Protein (VCP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16435 神經(jīng)介素U(NMU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuromedin U (NMU) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16436 信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子6(STAT6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Signal Transducer And Activator Of Transcription 6 (STAT6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16437 阿黑皮素原(POMC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Proopiomelanocortin (POMC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16438 腦啡肽酶(NEP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neprilysin (NEP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16439 利鈉肽受體1(NPR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 1 (NPR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16440 利鈉肽受體2(NPR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 2 (NPR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16441 利鈉肽受體3(NPR3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 3 (NPR3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16442 *受體1(FOLR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16443 跨膜*蛋白酶6(TMPRSS6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 6 (TMPRSS6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16444 神經(jīng)肽Y受體Y5(NPY5R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y5 (NPY5R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16445 活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-Cells, Cytoplasmic 2 (NFATC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16446 TERF1相互作用核因子2(TINF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TERF1 Interacting Nuclear Factor 2 (TINF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16447 溶質(zhì)載體家族30成員10(SLC30A10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30, Member 10 (SLC30A10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16448 內(nèi)β-N-乙酰基氨基葡萄糖苷酶(ENGASE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endo Beta-N-Acetylglucosaminidase (ENGASE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16449 孕酮免疫調(diào)節(jié)結(jié)合因子1(PIBF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Progesterone Immunomodulatory Binding Factor 1 (PIBF1) 48T/96T Homo sapiens 人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒(Human)
16450 乙醛氧化酶1(AOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldehyde Oxidase 1 (AOX1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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