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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-26 09:53:55瀏覽次數(shù):502次
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植物25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
植物25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在植物25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
16107 生長分化因子3(GDF3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 3 (GDF3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16108 生長分化因子1(GDF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16109 生長分化因子1(GDF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 1 (GDF1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16110 干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16111 干擾素誘導(dǎo)T-細(xì)胞α亞族趨化劑(ITαC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Inducible T-Cell Alpha Chemoattractant (ITaC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16112 VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16113 VEGF共調(diào)節(jié)趨化因子1(VCC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for VEGF Co Regulated Chemokine 1 (VCC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16114 白細(xì)胞介素24(IL24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 24 (IL24) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16115 神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin II (NPTX2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16116 羧肽酶N1(CPN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxypeptidase N1 (CPN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16117 緩激肽受體B2(BDKRB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bradykinin Receptor B2 (BDKRB2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16118 含BED型鋅指蛋白3(ZBED3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Finger, BED Type Containing Protein 3 (ZBED3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16119 白細(xì)胞彈性蛋白酶抑制因子(LEI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leukocyte Elastase Inhibitor (LEI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16120 骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16121 天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aspartate Aminotransferase (AST) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
16122 蛋白激酶Bβ(PKBβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase B Beta (PKBb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16123 帕金森氏病蛋白2(PARK2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Parkinson Disease Protein 2 (PARK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16124 鈣蛋白酶2(CAPN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 2, Large Subunit (CAPN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16125 內(nèi)切核酸酶G(ENDOG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endonuclease G, Mitochondrial (ENDOG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16126 甲基CpG結(jié)合蛋白2(MECP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Methyl CpG Binding Protein 2 (MECP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16127 Apelin 17蛋白(AP17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apelin 17 (AP17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16128 小亞基鈣蛋白酶1(CAPNS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain, Small Subunit 1 (CAPNS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16129 *棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶長鏈堿性亞基3(SPTLC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine Palmitoyltransferase, Long Chain Base Subunit 3 (SPTLC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16130 血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin I (AngI) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
16131 肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fatty Acid Binding Protein 1, Liver (FABP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16132 載脂蛋白A4(APOA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16133 多聚蛋白1(MMRN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Multimerin 1 (MMRN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16134 磷脂轉(zhuǎn)運蛋白(PLTP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipid Transfer Protein (PLTP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16135 羧肽酶N2(CPN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxypeptidase N2 (CPN2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
16136 谷光甘肽合成酶(GSS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Synthetase (GSS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16137 Egl Nine同源物1(EGLN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Egl Nine Homolog 1 (EGLN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16138 眼小畸形關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)錄因子(MITF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Microphthalmia Associated Transcription Factor (MITF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16139 溶血*酰基轉(zhuǎn)移酶1(LPCAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 1 (LPCAT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16140 溶血*?;D(zhuǎn)移酶2(LPCAT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 2 (LPCAT2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16141 溶血*酰基轉(zhuǎn)移酶3(LPCAT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 3 (LPCAT3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16142 溶血*?;D(zhuǎn)移酶4(LPCAT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 4 (LPCAT4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
16143 泛素蛋白連接酶E3成分N-識別蛋白4(UBR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Protein Ligase E3 Component N-Recognin 4 (UBR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16144 非ATP酶蛋白酶體26S亞基10(PSMD10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16145 肝配蛋白A受體3(EPHA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ephrin Type A Receptor 3 (EPHA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16146 含桿狀病毒IAP重復(fù)蛋白6(BIRC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Baculoviral IAP Repeat Containing Protein 6 (BIRC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16147 非紅細(xì)胞血影蛋白β4(SPTβN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spectrin Beta, Non Erythrocytic 4 (SPTbN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
16148 生長激素促分泌素受體(GHSR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Growth Hormone Secretagogue Receptor (GHSR) 48T/96T Homo sapiens植物25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 (Human)
16149 肌紅蛋白(MYO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5植物25羥基*3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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