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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-22 02:42:44瀏覽次數(shù):632次
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植物激素脫落酸(ABA )ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
植物激素脫落酸(ABA )ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在植物激素脫落酸(ABA )ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
15725 角鯊烯單加氧酶(SQLE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Squalene Epoxidase (SQLE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15726 分泌型磷蛋白2(SPP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secreted Phosphoprotein 2 (SPP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15727 甾醇-O-?;D(zhuǎn)移酶2(SOAT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sterol-O-Acyltransferase 2 (SOAT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15728 伸展蛋白(SNPH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaphilin (SNPH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15729 N-磺氨基葡糖磺基氫化酶(SGSH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Sulfoglucosamine Sulfohydrolase (SGSH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15730 *組合因子3(SERINC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine Incorporator 3 (SERINC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15731 生精蛋白Ⅱ(SEMG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semenogelin II (SEMG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15732 生精蛋白Ⅰ(SEMG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semenogelin I (SEMG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15733 *脫水酶(SDS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine Dehydratase (SDS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15734 硒代半*裂解酶(SCLY)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selenocysteine Lyase (SCLY) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15735 肌切蛋白(SCIN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Scinderin (SCIN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15736 上池蛋白(SBSN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Suprabasin (SBSN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15737 肉瘤抗原1(SAGE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sarcoma Antigen 1 (SAGE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15738 旋轉(zhuǎn)蛋白(RTTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Rotatin (RTTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15739 濕結(jié)合蛋白(RTBDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retbindin (RTBDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15740 休眠蛋白(RSN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Restin (RSN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15741 Repetin蛋白(RPTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Repetin (RPTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15742 RNA甲基轉(zhuǎn)移酶(RNMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RNA Methyltransferase (RNMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15743 核黃素激酶(RFK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Riboflavin Kinase (RFK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15744 *飽和酶(RETSAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinol Saturase (RETSAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15745 *脫氫酶12(RDH12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 12 (RDH12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15746 *脫氫酶11(RDH11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 11 (RDH11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15747 *脫氫酶10(RDH10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 10 (RDH10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15748 *脫氫酶8(RDH8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 8 (RDH8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15749 *脫氫酶5(RDH5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 5 (RDH5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15750 網(wǎng)鈣蛋白3(RCN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulocalbin 3 (RCN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15751 網(wǎng)鈣蛋白2(RCN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulocalbin 2 (RCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15752 網(wǎng)鈣蛋白1(RCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulocalbin 1 (RCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15753 核糖激酶(RBKS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribokinase (RBKS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15754 6-丙酮酰四氫蝶呤合酶(PTS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 6-Pyruvoyltetrahydropterin Synthase (PTS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15755 磷脂酰*合酶2(PTDSS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphatidylserine Synthase 2 (PTDSS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15756 磷脂酰*合酶1(PTDSS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphatidylserine Synthase 1 (PTDSS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15757 表膠質(zhì)蛋白(PRX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Periaxin (PRX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15758 *2(PRM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protamine 2 (PRM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15759 *1(PRM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protamine 1 (PRM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15760 催乳素受體(PRLR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prolactin Receptor (PRLR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15761 脯氨酰內(nèi)肽酶(PREP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prolyl Endopeptidase (PREP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15762 胚胎植入前蛋白3(PREI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Preimplantation Protein 3 (PREI3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15763 松果腺蛋白(PNN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pinin (PNN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15764 磷酸甲羥戊酸激酶(PMVK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphomevalonate Kinase (PMVK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15765 叢狀蛋白A1(PLXNA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plexin A1 (PLXNA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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