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上海紀寧酶聯科技有限公司
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菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
15475 突觸融合蛋白6(STX6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 6 (STX6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15476 突觸融合蛋白7(STX7)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 7 (STX7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15477 突觸融合蛋白8(STX8)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 8 (STX8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15478 突觸融合蛋白1B(STX1B)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 1B (STX1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15479 突觸融合蛋白10(STX10)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 10 (STX10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15480 突觸融合蛋白11(STX11)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 11 (STX11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15481 突觸融合蛋白12(STX12)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 12 (STX12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15482 突觸融合蛋白16(STX16)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 16 (STX16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15483 突觸融合蛋白17(STX17)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 17 (STX17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15484 突觸融合蛋白18(STX18)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Syntaxin 18 (STX18) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15485 Surfeit 2蛋白(SURF2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfeit 2 (SURF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15486 Surfeit 3蛋白(SURF3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfeit 3 (SURF3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15487 Surfeit 4蛋白(SURF4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfeit 4 (SURF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15488 Surfeit 6蛋白(SURF6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Surfeit 6 (SURF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15489 突觸回蛋白4(SYNGR4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptogyrin 4 (SYNGR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15490 突觸回蛋白2(SYNGR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptogyrin 2 (SYNGR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15491 突觸回蛋白3(SYNGR3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synaptogyrin 3 (SYNGR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15492 硒磷酸合成酶2(SEPHS2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Selenophosphate Synthetase 2 (SEPHS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15493 胞漿磷蛋白2(STMN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stathmin 2 (STMN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15494 胞漿磷蛋白3(STMN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stathmin 3 (STMN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15495 Nesprin 2蛋白(Nesp2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nesprin 2 (Nesp2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15496 Nesprin 1蛋白(Nesp1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nesprin 1 (Nesp1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15497 抗肌萎縮蛋白(UTRN)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Utrophin (UTRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15498 動力蛋白激活蛋白1(DCTN1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynactin 1 (DCTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15499 動力蛋白激活蛋白3(DCTN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynactin 3 (DCTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15500 動力蛋白激活蛋白4(DCTN4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynactin 4 (DCTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15501 動力蛋白激活蛋白5(DCTN5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynactin 5 (DCTN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15502 動力蛋白激活蛋白6(DCTN6)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dynactin 6 (DCTN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15503 網狀蛋白4受體(RTN4R)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulon 4 Receptor (RTN4R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15504 網狀蛋白2(RTN2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulon 2 (RTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15505 網狀蛋白3(RTN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulon 3 (RTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15506 網狀蛋白4(RTN4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Reticulon 4 (RTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15507 神經肽B(NPB)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide B (NPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15508 *受體2(SSTR2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 2 (SSTR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15509 *受體3(SSTR3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 3 (SSTR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15510 *受體4(SSTR4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 4 (SSTR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15511 *受體5(SSTR5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Somatostatin Receptor 5 (SSTR5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15512 視蛋白5(OPN5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Opsin 5 (OPN5) 48T/96T Homo sapiens 菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒(Human)
15513 視蛋白4(OPN4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Opsin 4 (OPN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5菜豆凝集素(PHA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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