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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-18 18:08:12瀏覽次數(shù):374次
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荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
15313 中心體蛋白1(CETN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Centrin 1 (CETN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15314 羧酸酯酶2(CES2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxylesterase 2 (CES2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15315 羧酸酯酶3(CES3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxylesterase 3 (CES3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15316 糖合酶3(CHSY3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carbohydrate Synthase 3 (CHSY3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15317 封閉蛋白2(CLDN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 2 (CLDN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15318 封閉蛋白5(CLDN5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 5 (CLDN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15319 封閉蛋白16(CLDN16)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 16 (CLDN16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15320 封閉蛋白7(CLDN7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 7 (CLDN7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15321 封閉蛋白8(CLDN8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 8 (CLDN8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15322 封閉蛋白12(CLDN12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 12 (CLDN12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15323 封閉蛋白14(CLDN14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 14 (CLDN14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15324 Archain 1蛋白(ARCN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Archain 1 (ARCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15325 羧肽酶A4(CPA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase A4 (CPA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15326 羧肽酶A5(CPA5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase A5 (CPA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15327 羧肽酶A6(CPA6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase A6 (CPA6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15328 羧肽酶D(CPD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase D (CPD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15329 羧肽酶N2(CPN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase N2 (CPN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15330 羧肽酶O(CPO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase O (CPO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15331 羧肽酶Z(CPZ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase Z (CPZ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15332 *羧肽酶1(SCPEP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serine Carboxypeptidase 1 (SCPEP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15333 復(fù)合素3(CPLX3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complexin 3 (CPLX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15334 復(fù)合素4(CPLX4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complexin 4 (CPLX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15335 隱花色素2(CRY2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cryptochrome 2 (CRY2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15336 晶狀體蛋白λ1(CRYλ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Crystallin Lambda 1 (CRYl1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15337 晶狀體蛋白μ(CRYμ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Crystallin Mu (CRYm) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15338 晶狀體蛋白ζ(CRYζ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Crystallin Zeta (CRYz) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15339 Cullin 9蛋白(CUL9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 9 (CUL9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15340 Cullin 7蛋白(CUL7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 7 (CUL7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15341 Cullin 2蛋白(CUL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 2 (CUL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15342 Cullin 3蛋白(CUL3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 3 (CUL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15343 Cullin 4A蛋白(CUL4A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 4A (CUL4A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15344 Cullin 5蛋白(CUL5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 5 (CUL5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15345 Cullin 4B蛋白(CUL4B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cullin 4B (CUL4B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15346 停靠蛋白2(DOK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Docking Protein 2 (DOK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15347 ??康鞍?(DOK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Docking Protein 3 (DOK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15348 ??康鞍?(DOK4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Docking Protein 4 (DOK4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15349 停靠蛋白5(DOK5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Docking Protein 5 (DOK5) 48T/96T Homo sapiens荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒 (Human)
15350 ??康鞍?(DOK6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Docking Protein 6 (DOK6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5荊豆凝集素(UEA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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