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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-24 00:53:51瀏覽次數(shù):626次
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植物生長激素(GH )ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
植物生長激素(GH )ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在植物生長激素(GH )ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
15146 */*/半*/*轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ASCT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alanine/Serine/Cysteine/Threonine Transporter (ASCT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15147 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12(GLUT12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 12 (GLUT12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15148 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10(GLUT10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 10 (GLUT10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15149 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11(GLUT11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 11 (GLUT11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15150 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7(GLUT7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 7 (GLUT7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15151 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白14(GLUT14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 14 (GLUT14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15152 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(GLUT5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 5 (GLUT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15153 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6(GLUT6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 6 (GLUT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15154 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白9(GLUT9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 9 (GLUT9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15155 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8(GLUT8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 8 (GLUT8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15156 鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(NKCC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Na-K-Cl Cotransporter 1 (NKCC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15157 陰離子/糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(AST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anion/Sugar Transporter (AST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15158 鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(SGLT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 1 (SGLT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15159 鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(SGLT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 2 (SGLT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15160 X-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3(Xtrp3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for X-Transporter protein 3 (Xtrp3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15161 *轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(GLYT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycine Transporter 2 (GLYT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15162 ?;撬徂D(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAUT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Taurine Transporter (TAUT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15163 X-轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(Xtrp2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for X-Transporter protein 2 (Xtrp2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15164 *轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLYT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycine Transporter 1 (GLYT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15165 *轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FOLT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Folate Transporter (FOLT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15166 尿酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(URAT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Urate Transporter 1 (URAT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15167 線粒體鐵蛋白(MFRN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mitoferrin (MFRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15168 檸檬素(Citrin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Citrin 48T/96T Homo sapiens (Human)
15169 溶質(zhì)載體家族26成員4(SLC26A4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 26, Member 4 (SLC26A4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15170 Prestin蛋白(PRES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prestin (PRES) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15171 腎膠原凝集素1(CLK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collectin Kidney 1 (CLK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15172 Gasdermin D蛋白(GSDMD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Gasdermin D (GSDMD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15173 Gasdermin B蛋白(GSDMB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Gasdermin B (GSDMB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15174 Gasdermin A蛋白(GSDMA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Gasdermin A (GSDMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15175 Tafazzin蛋白(TAZ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tafazzin (TAZ) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15176 卷曲同源物1(FZD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 1 (FZD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15177 卷曲同源物2(FZD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 2 (FZD2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15178 卷曲同源物3(FZD3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 3 (FZD3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15179 卷曲同源物7(FZD7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 7 (FZD7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15180 卷曲同源物5(FZD5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Frizzled Homolog 5 (FZD5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15181 B-細(xì)胞淋巴瘤因子9(Bcl9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 9 (Bcl9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15182 B-細(xì)胞淋巴瘤因子6(Bcl6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 6 (Bcl6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15183 B-細(xì)胞淋巴瘤因子8(Bcl8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 8 (Bcl8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15184 二氫嘧啶酶(DPYS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dihydropyrimidinase (DPYS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15185 SHC-轉(zhuǎn)化蛋白3(SHC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for SHC-Transforming Protein 3 (SHC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
15186 SHC-轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for SHC-Transforming Protein 1 (SHC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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