藍耳病ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在藍耳病ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

14899 斜方蛋白1(RHOM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Rhombotin 1 (RHOM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14900 核糖核酸外切酶1(ERI1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exoribonuclease 1 (ERI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14901 核糖核酸酶K(RNASEK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease K (RNASEK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14902 5'-3'外切核糖核酸酶1(XRN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 5'-3'Exoribonuclease 1 (XRN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14903 5'-3'外切核糖核酸酶2(XRN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 5'-3'Exoribonuclease 2 (XRN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14904 核糖核酸酶A2(RNASE2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A2 (RNASE2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14905 泛素C(UBC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin C (UBC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14906 干擾素ε(IFNε)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Epsilon (IFNe) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14907 干擾素κ(IFNκ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Kappa (IFNk) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14908 對氧磷酶2(PON2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paraoxonase 2 (PON2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14909 核連蛋白1(NUCB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleobindin 1 (NUCB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14910 核連蛋白2(NUCB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nucleobindin 2 (NUCB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14911 速激肽4(TAC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tachykinin 4 (TAC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14912 粘蛋白21(MUC21)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mucin 21 (MUC21) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14913 蔗糖酶異麥芽糖酶(SI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sucrase Isomaltase (SI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14914 核糖核酸酶A4(RNASE4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A4 (RNASE4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14915 核糖核酸酶A8(RNASE8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A8 (RNASE8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14916 核糖核酸酶A6(RNASE6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A6 (RNASE6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14917 核糖核酸酶A7(RNASE7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A7 (RNASE7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14918 轉(zhuǎn)運蛋白2(TNPO2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transportin 2 (TNPO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14919 橋粒芯糖蛋白4(DSG4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Desmoglein 4 (DSG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14920 胸腺旁腺素(PTMS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Parathymosin (PTMS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14921 單酰甘油脂肪酶(MGL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipase, Monoacylglycerol (MGL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14922 角蛋白6A(KRT6A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 6A (KRT6A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14923 失調(diào)蛋白10(ATXN10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ataxin 10 (ATXN10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14924 失調(diào)蛋白7(ATXN7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ataxin 7 (ATXN7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14925 失調(diào)蛋白3(ATXN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ataxin 3 (ATXN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14926 線粒體鐵蛋白(FTMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ferritin, Mitochondrial (FTMT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14927 饑餓素/肥胖抑制素前激素原(GHRL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ghrelin/Obestatin Preprohormone (GHRL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14928 胃動素受體(MLNR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Motilin Receptor (MLNR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14929 細胞周期素A(CCNA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin A (CCNA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14930 細胞周期素A1(CCNA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin A1 (CCNA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14931 細胞周期素B(CCNB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin B (CCNB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14932 細胞周期素B2(CCNB2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin B2 (CCNB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14933 細胞周期素B3(CCNB3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin B3 (CCNB3) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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