荷蘭賽迪口蹄疫0型2板ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在荷蘭賽迪口蹄疫0型2板ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

14693 B-細胞淋巴瘤因子10(Bcl10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Cell CLL/Lymphoma 10 (Bcl10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14694 堿核蛋白1(BNC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Basonuclin 1 (BNC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14695 布皮質(zhì)素1(BEST1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bestrophin 1 (BEST1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14696 胱天蛋白酶6(CASP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 6 (CASP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14697 突觸核蛋白β(SNCβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Synuclein Beta (SNCb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14698 鈣營養(yǎng)蛋白1(CALN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calneuron 1 (CALN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14699 羰基還原酶1(CBR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbonyl Reductase 1 (CBR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14700 細胞周期素F(CCNF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin F (CCNF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14701 胞苷脫氨酶(CDA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytidine Deaminase (CDA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14702 羧酸酯酶1(CES1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxylesterase 1 (CES1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14703 軟骨凝集蛋白(CHODL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chondrolectin (CHODL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14704 糖合酶1(CHSY1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carbohydrate Synthase 1 (CHSY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14705 網(wǎng)格蛋白交互子1(CLINT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Clathrin Interactor 1 (CLINT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14706 *穩(wěn)定蛋白(CORT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cortistatin (CORT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14707 羧肽酶M(CPM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxypeptidase M (CPM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14708 復合素1(CPLX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complexin 1 (CPLX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14709 肉毒堿乙酰轉移酶(CRAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carnitine Acetyltransferase (CRAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14710 肉毒堿-O-甲基轉移酶(CORT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carnitine-O-Octanoyltransferase (CORT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14711 肘臀蛋白(CUBN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cubilin (CUBN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14712 Cullin 1蛋白(CUL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cullin 1 (CUL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14713 降鈣素受體(CTR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcitonin Receptor (CTR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14714 鈣聯(lián)接蛋白(CLGN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calmegin (CLGN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14715 鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpastatin (CAST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14716 嵌合蛋白2(CHN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chimerin 2 (CHN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14717 Cylindromatosis蛋白(CYLD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cylindromatosis (CYLD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14718 細胞球蛋白(CYGB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytoglobin (CYGB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14719 ?？康鞍?(DOK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Docking Protein 1 (DOK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14720 異連蛋白α(DTNα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dystrobrevin Alpha (DTNa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14721 Dymeclin蛋白(DYM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dymeclin (DYM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14722 雙氧化酶1(DUOX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dual Oxidase 1 (DUOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14723 角化不良蛋白(DKC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dyskerin (DKC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14724 Dystonin蛋白(DST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dystonin (DST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14725 外異蛋白A(EDA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ectodysplasin A (EDA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14726 內(nèi)粘蛋白(EMCN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endomucin (EMCN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14727 Enamelin蛋白(ENAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enamelin (ENAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14728 內(nèi)磺肽α(ENSα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endosulfine Alpha (ENSa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14729 內(nèi)皮素3(EDN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Endothelin 3 (EDN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14730 核酸外切酶1(EXO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exonuclease 1 (EXO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14731 纖維化蛋白(FBS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibrosin (FBS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14732 鐵氧還蛋白1(FDX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ferredoxin 1 (FDX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14733 脂筏特征蛋白2(FLOT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Flotillin 2 (FLOT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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