牛結(jié)核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在牛結(jié)核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

14655 整合素α7(ITGα7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Alpha 7 (ITGa7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14656 整合素α8(ITGα8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Alpha 8 (ITGa8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14657 整合素α9(ITGα9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Alpha 9 (ITGa9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14658 整合素α10(ITGα10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Alpha 10 (ITGa10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14659 整合素α11(ITGα11)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Alpha 11 (ITGa11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14660 整合素β5(ITGβ5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Beta 5 (ITGb5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14661 整合素β7(ITGβ7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Beta 7 (ITGb7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14662 整合素β8(ITGβ8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Beta 8 (ITGb8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14663 腱蛋白(CHRD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chordin (CHRD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14664 神經(jīng)秩蛋白(NRTN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurturin (NRTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14665 神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurocan (NCAN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14666 早老素1(PSEN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14667 連環(huán)蛋白α1(CTNNα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Catenin Alpha 1 (CTNNa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14668 兩性蛋白(AMPH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Amphiphysin (AMPH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14669 組蛋白脫乙酰基酶1(HDAC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 1 (HDAC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14670 Vav1癌基因(VAV1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vav 1 Oncogene (VAV1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14671 輔肌動(dòng)蛋白α4(ACTN4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Actinin Alpha 4 (ACTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14672 Atrophin 1蛋白(ATN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Atrophin 1 (ATN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14673 類固醇生成因子1(SF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Steroidogenic Factor 1 (SF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14674 皮層肌動(dòng)蛋白(CTTN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cortactin (CTTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14675 斑聯(lián)蛋白(ZYX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Zyxin (ZYX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14676 輔肌動(dòng)蛋白α1(ACTN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Actinin Alpha 1 (ACTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14677 脫氧核糖核酸酶Ⅱ(DNASEⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease II (DNASEII) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14678 Pirin蛋白(PIR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pirin (PIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14679 輸出蛋白1(XPO1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exportin 1 (XPO1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14680 融合蛋白(FUS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fusion (FUS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14681 7-脫氫*還原酶(DHCR7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for 7-Dehydrocholesterol Reductase (DHCR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14682 氨基?；?(ACY1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aminoacylase 1 (ACY1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14683 內(nèi)收蛋白1(ADD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adducin 1 (ADD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14684 腺苷激酶(ADK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adenosine Kinase (ADK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14685 腺苷酸激酶2(AK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adenylate Kinase 2 (AK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14686 無羊膜蛋白(AMN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Amnionless (AMN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14687 血管抑素結(jié)合蛋白(AMOT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Angiomotin (AMOT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14688 Attractin蛋白(ATRN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Attractin (ATRN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14689 失調(diào)蛋白2(ATXN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ataxin 2 (ATXN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14690 抗酶抑制因子1(AZIN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Antizyme Inhibitor 1 (AZIN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14691 Aprataxin蛋白(APTX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aprataxin (APTX) 48T/96T Homo sapiens 牛結(jié)核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒(Human)
14692 天冬酰胺氨基葡萄糖酶(AGA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aspartylglucosaminidase (AGA) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5牛結(jié)核病抗體(TB-Ab)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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