羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

14411 Rhotekin 2蛋白(RTKN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Rhotekin 2 (RTKN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14412 N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶30(NαA30)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 30 (NaA30) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14413 Notchless蛋白(NLE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Notchless (NLE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14414 Rho蛋白2(RHPN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Rhophilin 2 (RHPN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14415 *脫氫酶13(RDH13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 13 (RDH13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14416 *脫氫酶14(RDH14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Retinol Dehydrogenase 14 (RDH14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14417 腺苷酸激酶7(AK7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adenylate Kinase 7 (AK7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14418 連接蛋白4(JPH4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Junctophilin 4 (JPH4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14419 核糖核酸酶A9(RNASE9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ribonuclease A9 (RNASE9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14420 Anoctamin 9蛋白(ANO9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anoctamin 9 (ANO9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14421 N-去乙?；?磺基轉(zhuǎn)移酶4(NDST4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Deacetylase/N-Sulfotransferase 4 (NDST4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14422 Clarin 3蛋白(CLRN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Clarin 3 (CLRN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14423 轉(zhuǎn)位因子蛋白2(TSPO2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Translocator Protein 2 (TSPO2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14424 半椎蛋白2(HMCN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hemicentin 2 (HMCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14425 Akirin 2蛋白(AKIRIN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Akirin 2 (AKIRIN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14426 親核素α7(KPNα7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Karyopherin Alpha 7 (KPNa7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14427 泛核蛋白2(UBN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ubinuclein 2 (UBN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14428 鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(SGLT4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 4 (SGLT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14429 肌腱蛋白N(TNN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tenascin N (TNN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14430 蛋白O-葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶1(POGLUT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein O-Glucosyltransferase 1 (POGLUT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14431 N-乙酰轉(zhuǎn)移酶9(NAT9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 9 (NAT9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14432 鈉/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(SGLT5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sodium/Glucose Cotransporter 5 (SGLT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14433 *組合因子2(SERINC2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serine Incorporator 2 (SERINC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14434 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶6(ENPP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 6 (ENPP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14435 脂肪酶K(LIPK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lipase K (LIPK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14436 脂肪酶N(LIPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lipase N (LIPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14437 脂肪酶M(LIPM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lipase M (LIPM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14438 CopineⅧ蛋白(CPNE8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Copine VIII (CPNE8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14439 Paladin蛋白(PALD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Paladin (PALD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14440 環(huán)氧化合物水解酶4(EPHX4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 4 (EPHX4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14441 環(huán)氧化合物水解酶3(EPHX3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Epoxide Hydrolase 3 (EPHX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14442 磷脂酶D4(PLD4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholipase D4 (PLD4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14443 Serrate蛋白(SRRT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serrate (SRRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14444 突觸囊泡蛋白ⅩⅦ(SYT17)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Synaptotagmin XVII (SYT17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14445 酵母氨酸脫氫酶(SCCPDH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Saccharopine Dehydrogenase (SCCPDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14446 CopineⅨ蛋白(CPNE9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Copine IX (CPNE9) 48T/96T Homo sapiens羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒 (Human)
14447 N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶35(NαA35)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 35 (NaA35) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14448 Tectonic 3蛋白(TCTN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tectonic 3 (TCTN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5羅氏沼蝦諾達(dá)病毒(MrNV)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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