蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原（vtg)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原（vtg)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

14331 G抗原3(GAGE3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 3 (GAGE3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14332 磷酸*(Php)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphohippolin(Php) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14333 Rabconnectin 3蛋白(RC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Rabconnectin 3 (RC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14334 接觸蛋白6(CNTN6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Contactin 6 (CNTN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14335 接觸蛋白5(CNTN5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Contactin 5 (CNTN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14336 封閉蛋白19(CLDN19)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 19 (CLDN19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14337 Codanin 1蛋白(CDAN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Codanin 1 (CDAN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14338 鈣結(jié)合蛋白3(CALB3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calbindin 3 (CALB3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14339 含鈣通道Flower域蛋白(CACFD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcium Channel Flower Domain Containing Protein 1 (CACFD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14340 耦合因子6(CF6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coupling Factor 6 (CF6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14341 乙醛氧化酶1(AOX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aldehyde Oxidase 1 (AOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14342 二氫二醇脫氫酶2(DDH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dihydrodiol Dehydrogenase 2 (DDH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14343 細胞周期素M4(CCNM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin M4 (CNNM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14344 細胞周期素M1(CCNM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin M1 (CNNM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14345 細胞周期素M2(CCNM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin M2 (CNNM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14346 細胞周期素M3(CCNM3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cyclin M3 (CNNM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14347 氨肽酶O(APO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aminopeptidase O (APO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14348 鈣蛋白酶8(CAPN8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 8 (CAPN8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14349 封閉蛋白10(CLDN10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 10 (CLDN10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14350 封閉蛋白15(CLDN15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 15 (CLDN15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14351 封閉蛋白17(CLDN17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 17 (CLDN17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14352 封閉蛋白20(CLDN20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 20 (CLDN20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14353 封閉蛋白22(CLDN22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 22 (CLDN22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14354 封閉蛋白6(CLDN6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 6 (CLDN6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14355 肌動蛋白束蛋白3(FSCN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fascin 3 (FSCN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14356 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶5(GALNT5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 5 (GALNT5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14357 *過氧化酶7(GPX7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione Peroxidase 7 (GPX7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14358 水通道蛋白12B(AQP12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aquaporin 12B (AQP12B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14359 ATP合酶6(ATP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATP Synthase 6 (ATP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14360 NADH脫氫酶1(ND1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase 1 (ND1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14361 細胞色素b(COB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome b (COB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14362 信號素4B(SEMA4B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semaphorin 4B (SEMA4B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14363 半*蛋白酶抑制劑9(CST9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cystatin 9 (CST9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14364 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶5(ENPP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 5 (ENPP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14365 *3(PRM3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protamine 3 (PRM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14366 神經(jīng)肽VF(NPVF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide VF (NPVF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14367 *蛋白酶肽酶抑制因子B支成員11(SERPINB11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serpin Peptidase Inhibitor Clade B Member 11 (SERPINB11) 48T/96T Homo sapiens蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原（vtg)ELISA試劑盒 (Human)
14368 鈣黏蛋白24(CDH24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin 24 (CDH24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14369 腦啡肽酶2(NEP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neprilysin 2 (NEP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5蝶蛹金小蜂卵黃蛋白原（vtg)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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