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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-12 15:01:53瀏覽次數(shù):364次
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家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
14289 Marapsin蛋白(MPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Marapsin (MPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14290 NeurabinⅠ蛋白(NRB1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neurabin I (NRB1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14291 載脂蛋白L5(APOL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein L5 (APOL5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14292 載脂蛋白L4(APOL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein L4 (APOL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14293 Collybistin蛋白(CB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collybistin (CB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14294 Epiprofin蛋白(Epfn)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Epiprofin (Epfn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14295 含溴區(qū)PHD指蛋白1(BRPF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bromodomain And PHD Finger Containing Protein 1 (BRPF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14296 輔激活因子激活因子(COAA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coactivator Activator (COAA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14297 含PR域蛋白10(PRDM10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for PR Domain Containing Protein 10 (PRDM10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14298 睪素3(TIC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Testican 3 (TIC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14299 鈣蛋白酶12(CAPN12)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpain 12 (CAPN12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14300 Fruitless蛋白(FRU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fruitless (FRU) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14301 Heterotaxy 1蛋白(HTX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heterotaxy 1 (HTX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14302 木酮糖酶同源物(XYLB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Xylulokinase Homolog (XYLB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14303 嗅蛋白(Olfactorin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Olfactorin 48T/96T Homo sapiens (Human)
14304 Meichroacidin蛋白(MCA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Meichroacidin (MCA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14305 RIO激酶3(RIOK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for RIO Kinase 3 (RIOK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14306 */*激酶25(STK25)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 25 (STK25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14307 */*激酶24(STK24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 24 (STK24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14308 */*激酶10(STK10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine/Threonine Kinase 10 (STK10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14309 痙攣性截癱蛋白11(SPG11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Spastic Paraplegia 11 (SPG11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14310 銅轉(zhuǎn)運蛋白2(COPT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Copper Transporter 2 (COPT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14311 YY肽2(PYY2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptide YY 2 (PYY2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14312 蛋白聚糖3(PRG3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proteoglycan 3 (PRG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14313 磷酸二酯酶7B(PDE7B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphodiesterase 7B (PDE7B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14314 金屬泛激蛋白1(MPS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Metallopanstimulin 1 (MPS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14315 N-Myc交互子(NMI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for N-Myc Interactor (NMI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14316 滲出性玻璃體視網(wǎng)膜病變基因2(EVR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Exudative Vitreoretinopathy 2 (EVR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14317 肌球蛋白ⅤC(MYO5C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myosin VC (MYO5C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14318 基質(zhì)重塑關(guān)聯(lián)蛋白8(MXRA8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Remodelling Associated Protein 8 (MXRA8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14319 金屬硫蛋白1L(MT1L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Metallothionein 1L (MT1L) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14320 LIM半*豐富域蛋白1(LMCD1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for LIM And Cysteine Rich Domains Protein 1 (LMCD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14321 失嗅蛋白1(ADMLX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anosmin 1 (ADMLX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14322 造血蛋白1(HEM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hematopoietic Protein 1 (HEM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14323 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶9(GALNT9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 9 (GALNT9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14324 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶8(GALNT8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 8 (GALNT8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14325 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶7(GALNT7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 7 (GALNT7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14326 G抗原8(GAGE8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 8 (GAGE8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14327 G抗原7(GAGE7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 7 (GAGE7) 48T/96T Homo sapiens家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒 (Human)
14328 G抗原6(GAGE6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 6 (GAGE6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14329 G抗原5(GAGE5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for G Antigen 5 (GAGE5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5家蠶卵黃蛋白(LT) ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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