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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-28 23:18:09瀏覽次數(shù):534次
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毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
14209 含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白27(ZFYVE27)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 27 (ZFYVE27) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14210 驅(qū)動(dòng)結(jié)合蛋白(KNCN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kinocilin (KNCN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14211 Consortin蛋白(CNST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Consortin (CNST) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14212 Protogenin蛋白(PRTG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protogenin (PRTG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14213 Tectonic 1蛋白(TCTN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tectonic 1 (TCTN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14214 PTB結(jié)合核蛋白2(RAVER2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ribonucleoprotein, PTB Binding 2 (RAVER2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14215 Girdin蛋白(GRDN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Girdin (GRDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14216 Erlectin 1蛋白(ERLEC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Erlectin 1 (ERLEC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14217 Dermokine蛋白(DMKN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dermokine (DMKN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14218 Genethonin 1蛋白(GEN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Genethonin 1 (GEN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14219 TBC1域家族成員10C(TBC1D10C)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TBC1 Domain Family, Member 10C (TBC1D10C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14220 烯醇化酶磷酸酶1(ENOPH1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Enolase Phosphatase 1 (ENOPH1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14221 Hyccin蛋白(HCC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hyccin (HCC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14222 Dendrin蛋白(DDN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dendrin (DDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14223 N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶25(NαA25)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 25 (NAA25) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14224 甘油酸激酶(GLYCTK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycerate Kinase (GLYCTK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14225 Recepin蛋白(CIR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Recepin (CIR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14226 Reprimo蛋白(RPRM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Reprimo (RPRM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14227 天冬氨酸酰酶3(ACY3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aspartoacylase 3 (ACY3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14228 Archease蛋白(ARCH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Archease (ARCH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14229 肌動(dòng)絲蛋白(AF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Actinfilin (AF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14230 Spatial蛋白(C10ORF27)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Spatial (C10ORF27) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14231 唾液酸轉(zhuǎn)移酶7F(SIAT7F)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sialyltransferase 7F (SIAT7F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14232 唾液酸轉(zhuǎn)移酶8F(SIAT8F)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sialyltransferase 8F (SIAT8F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14233 Dystroin蛋白(DYTN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dystroin (DYTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14234 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶13(GALNT13)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 13 (GALNT13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14235 Isthmin 2蛋白(ISM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Isthmin 2 (ISM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14236 葡萄糖磷酸變位酶2樣蛋白1(PGM2L1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphoglucomutase 2 Like Protein 1 (PGM2L1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14237 含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白26(ZFYVE26)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 26 (ZFYVE26) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14238 含F(xiàn)YVE域鋅指蛋白16(ZFYVE16)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Zinc Finger, FYVE Domain Containing Protein 16 (ZFYVE16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14239 N-α-乙酰轉(zhuǎn)移酶38(NαA38)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Alpha-Acetyltransferase 38 (NAA38) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14240 Neuroguidin蛋白(NGDN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuroguidin (NGDN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14241 Kintoun蛋白(KTU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kintoun (KTU) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14242 AHNAK核蛋白2(AHNAK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for AHNAK Nucleoprotein 2 (AHNAK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14243 Rho蛋白1(RHPN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Rhophilin 1 (RHPN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14244 芐氯素1關(guān)聯(lián)自噬相關(guān)關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子(Barkor)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Beclin-1-Associated Autophagy Related Key Regulator (Barkor) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14245 Talpid 3蛋白(Talpid3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Talpid 3 (Talpid3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
14246 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶12(GALNT12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 12 (GALNT12) 48T/96T Homo sapiens毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒 (Human)
14247 多肽-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶10(GALNT10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 10 (GALNT10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5毒蛇因子(CVF) ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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