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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-23 02:32:07瀏覽次數(shù):398次
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鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
13963 AMPA離子能*受體3(GRIA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, AMPA 3 (GRIA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13964 封閉蛋白3(CLDN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 3 (CLDN3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13965 鈉鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(NKCC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Na-K-Cl Cotransporter 2 (NKCC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13966 鈉氯協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(NCCT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Na-Cl Cotransporter (NCCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13967 血管緊張素Ⅱ受體1(AGTR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13968 凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lectin Like Oxidized Low Density Lipoprotein Receptor 1 (LOX1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13969 肌球蛋白重鏈7(MYH7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 7, Cardiac Muscle, Beta (MYH7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13970 細(xì)胞色素P450家族成員11B1(CYP11B1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cytochrome P450 11B1 (CYP11B1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13971 碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅰ(DIO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type I (DIO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13972 碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type III (DIO3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13973 RNA結(jié)合基元蛋白20(RBM20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 20 (RBM20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13974 RNA結(jié)合基元蛋白24(RBM24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 24 (RBM24) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13975 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體(PVR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Poliovirus Receptor (PVR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13976 RNA結(jié)合基元蛋白38(RBM38)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for RNA Binding Motif Protein 38 (RBM38) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13977 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 48T/96T Ovis aries; Ovine (Sheep)
13978 甲狀腺素受體α(THRα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thyroid Hormone Receptor Alpha (THRa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13979 甲狀腺素受體α(THRα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thyroid Hormone Receptor Alpha (THRa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13980 碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅱ(DIO2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type II (DIO2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13981 橋粒芯膠粘蛋白2(DSC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Desmocollin 2 (DSC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13982 間隙連接蛋白β1(GJβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Gap Junction Protein Beta 1 (GJb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13983 含V-Set免疫球蛋白域蛋白2(VSIG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for V-Set And Immunoglobulin Domain Containing Protein 2 (VSIG2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13984 SPARC樣蛋白1(SPARCL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for SPARC Like Protein 1 (SPARCL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13985 Misato同源物1(MSTO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Misato Homolog 1 (MSTO1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13986 蛋白酶3(PR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13987 輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurofilament, Light Polypeptide (NEFL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13988 DNA激活蛋白激酶催化亞基肽(PRKDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase, DNA Activated, Catalytic Polypeptide (PRKDC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13989 ?;人崴饷?AOAH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Acyloxyacyl Hydrolase (AOAH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13990 龍蝦肽酶樣金屬內(nèi)肽酶(ASTL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Astacin Like Metallo Endopeptidase (ASTL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13991 酪蛋白β(CSN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Casein Beta (CSN2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13992 半*豐富分泌蛋白3(CRISP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cysteine Rich Secretory Protein 3 (CRISP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13993 2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 2 (OAS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13994 2',5'-寡腺苷酸合成酶3(OAS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for 2',5'-Oligoadenylate Synthetase 3 (OAS3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13995 降鈣素原(PCT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Procalcitonin (PCT) 48T/96T Rattus norvegicus鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒 (Rat)
13996 白介素10受體α(IL10Rα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 10 Receptor Alpha (IL10Ra) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13997 死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 1 (DAPK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13998 成纖維細(xì)胞激活蛋白α(FAPα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Activation Protein Alpha (FAPa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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