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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
13641 尿調(diào)蛋白(UMOD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Uromodulin (UMOD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13642 異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Isocitrate Dehydrogenase 1, Soluble (IDH1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13643 N-乙酰神經(jīng)氨酰酸合酶(NANS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Acetylneuraminic Acid Synthase (NANS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13644 4-羥基苯丙酮酸雙加氧酶(HPD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13645 碘甲腺原氨酸脫碘酶Ⅲ(DIO3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deiodinase, Iodothyronine, Type III (DIO3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13646 氫離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶溶酶體輔助蛋白2(ATP6AP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for ATPase, H+ Transporting, Lysosomal Accessory Protein 2 (ATP6AP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13647 芳香烴受體核轉(zhuǎn)位因子(ARNT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor Nuclear Translocator (ARNT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13648 白細(xì)胞衍生趨化因子2(LECT2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leukocyte Cell Derived Chemotaxin 2 (LECT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13649 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白2(TNFαIP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Alpha Induced Protein 2 (TNFaIP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13650 環(huán)腺苷二磷酸核糖水解酶(cADPRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cyclic ADP Ribose Hydrolase (cADPRH) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13651 Klothoβ蛋白(KLβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Klotho Beta (KLb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13652 脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅱ(P4Hα2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide II (P4Ha2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13653 N-myc下游調(diào)節(jié)基因2(NDRG2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-myc Downstream Regulated Gene 2 (NDRG2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13654 骨橋素(OPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteopontin (OPN) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13655 70kDa熱休克蛋白8(HSPA8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Heat Shock 70kDa Protein 8 (HSPA8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13656 Ⅲ型膠原α1(COL3α1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type III Alpha 1 (COL3a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13657 補(bǔ)體應(yīng)答基因32(RGC32)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Response Gene To Complement 32 (RGC32) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13658 角蛋白9(KRT9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Keratin 9 (KRT9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13659 松弛肽(RLN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Relaxin (RLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13660 無孢蛋白(ASPN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Asporin (ASPN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13661 突觸融合蛋白2(STX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Syntaxin 2 (STX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13662 白介素22受體α2(IL2Rα2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 22 Receptor Alpha 2 (IL22Ra2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13663 溶質(zhì)載體家族3成員2(SLC3A2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 3, Member 2 (SLC3A2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13664 骨織素(OSTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteocrin (OSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13665 骨織素(OSTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteocrin (OSTN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13666 線粒體解偶聯(lián)蛋白2(UCP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Uncoupling Protein 2, Mitochondrial (UCP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13667 神經(jīng)上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)化基因1(NET1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neuroepithelial Cell Transforming Gene 1 (NET1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13668 膜突蛋白()檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Moesin () 48T/96T Homo sapiens (Human)
13669 G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員A(GPRC5A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A (GPRC5A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13670 趨化因子C-X-C-基元受體6(CXCR6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 6 (CXCR6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13671 腱蛋白(CHRD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chordin (CHRD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13672 轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員2(TRPV2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 2 (TRPV2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13673 亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leucyl/Cystinyl Aminopeptidase (LNPEP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13674 脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 2 (ADIPOR2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13675 親環(huán)素A(CYPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cyclophilin A (CYPA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13676 朊病毒蛋白(PRNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prion Protein (PRNP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13677 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 1 (ADAMTS1) 48T/96T Rattus norvegicus綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒 (Rat)
13678 信號素3A(SEMA3A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 3A (SEMA3A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13679 Polycomb組環(huán)指蛋白4(PCGF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Polycomb Group Ring Finger Protein 4 (PCGF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5綿羊白介素2受體(IL-2R)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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