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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-10 16:52:13瀏覽次數(shù):350次
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綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
13519 ⅡA組磷脂酶A2(PLA2G2A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IIA (PLA2G2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13520 糖原合酶激酶3β(GSK3β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycogen Synthase Kinase 3 Beta (GSK3b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13521 核糖核酸酶L(RNASEL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease L (RNASEL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13522 激活T-細胞核因子1(NFATC1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nuclear Factor Of Activated T-Cells, Cytoplasmic 1 (NFATC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13523 Osterix蛋白(OSX)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Osterix (OSX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13524 C-型凝集素域家族2成員C(CLEC2C)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13525 溶血磷脂酸受體3(LPAR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid Receptor 3 (LPAR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13526 溶血磷脂酸受體3(LPAR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysophosphatidic Acid Receptor 3 (LPAR3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13527 胸腺旁腺素(PTMS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Parathymosin (PTMS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13528 脂解激活脂蛋白受體(LSR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipolysis Stimulated Lipoprotein Receptor (LSR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13529 肌球蛋白重鏈4(MYH4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myosin Heavy Chain 4, Skeletal Muscle (MYH4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13530 細胞程序性死亡蛋白1配體1(PDCD1LG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Programmed Cell Death Protein 1 Ligand 1 (PDCD1LG1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13531 同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13532 蛋白酶3(PR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proteinase 3 (PR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13533 黃嘌呤脫氫酶(XDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Xanthine Dehydrogenase (XDH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13534 鈷胺傳遞蛋白Ⅱ(TCN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transcobalamin II, Macrocytic Anemia (TCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13535 血小板反應蛋白4(THBS4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13536 血小板反應蛋白3(THBS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thrombospondin 3 (THBS3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13537 外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13538 外周鞘磷脂蛋白22(PMP22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peripheral Myelin Protein 22 (PMP22) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13539 1號染色體開放閱讀框85(C1orf85)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chromosome 1 Open Reading Frame 85 (C1orf85) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13540 醌NADH脫氫酶1(NQO1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for NADH Dehydrogenase, Quinone 1 (NQO1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13541 葡萄糖轉運蛋白4(GLUT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucose Transporter 4 (GLUT4) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
13542 脂素1(LPIN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lipin 1 (LPIN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13543 卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Follistatin Like Protein 3 (FSTL3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13544 甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13545 神經肽Y受體Y2(NPY2R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y2 (NPY2R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13546 神經肽Y受體Y1(NPY1R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide Y Receptor Y1 (NPY1R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13547 Anoctamin 6蛋白(ANO6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Anoctamin 6 (ANO6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13548 白三烯A4水解酶(LTA4H)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Leukotriene A4 Hydrolase (LTA4H) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13549 *Ⅺ(F11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Coagulation Factor XI (F11) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13550 肽聚糖識別蛋白1(PGLYRP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptidoglycan Recognition protein 1 (PGLYRP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13551 17-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD17β3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 17-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD17b3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13552 C-Raf原癌基因絲*蛋白激酶(CRAF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Raf Proto Oncogene Serine/Threonine Protein Kinase (CRAF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13553 野鼠色基因相關蛋白(AGRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Agouti Related Protein (AGRP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13554 前膠原C端蛋白酶增強子1(PCPE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Procollagen C Proteinase Enhancer 1 (PCPE1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13555 腫瘤壞死因子配體超家族成員13(TNFSF13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 13 (TNFSF13) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13556 血小板反應蛋白4(THBS4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Thrombospondin 4 (THBS4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13557 轉化受體電位陽離子通道亞家族V成員1(TRPV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily V, Member 1 (TRPV1) 48T/96T Homo sapiens綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 (Human)
13558 早幼粒細胞白血病蛋白(PML)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Promyelocytic Leukemia Protein (PML) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13559 細胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cystathionine Gamma Lyase (CSE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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