綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

13435 組蛋白脫乙?；?(HDAC6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histone Deacetylase 6 (HDAC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13436 Bcl2關(guān)聯(lián)永生基因3(BAG3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Bcl2 Associated Athanogene 3 (BAG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13437 胰島素降解酶(IDE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13438 ⅩⅤ型膠原(COL15)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type XV (COL15) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13439 絲織蛋白1(DBN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Drebrin 1 (DBN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13440 墨蝶呤還原酶(SPR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sepiapterin Reductase (SPR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13441 序列相似家族135成員B(FAM135B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 135, Member B (FAM135B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13442 甘油醛-3-磷酸脫氫酶(GAPDH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase (GAPDH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13443 分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Secretogranin V (SCG5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13444 煙堿型*受體α5(CHRNα5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 5 (CHRNa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13445 生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Growth Differentiation Factor 2 (GDF2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13446 含卷曲螺旋C2域蛋白1A(CC2D1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Coiled Coil And C2 Domain Containing Protein 1A (CC2D1A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13447 鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-2-Glycoprotein 1, Zinc Binding (aZGP1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13448 斯鈣素1(STC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Stanniocalcin 1 (STC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13449 絲蛋白結(jié)合LIM蛋白1(FBLIM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Filamin Binding LIM Protein 1 (FBLIM1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13450 L-型電壓依賴性鈣離子通道α1D亞基(CACNα1D)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1D Subunit (CACNa1D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13451 白介素1β(IL1β)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Beta (IL1b) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13452 神經(jīng)纖維素2(NF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurofibromin 2 (NF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13453 母系蛋白2(MATN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrilin 2 (MATN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13454 皮質(zhì)酮(CORT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Corticosterone (CORT) 48T/96T General
13455 抗利尿激素(ADH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13456 酪胺酸酶(TYR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tyrosinase (TYR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13457 組織蛋白酶G(CTSG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cathepsin G (CTSG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13458 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(HGFR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Hepatocyte Growth Factor Receptor (HGFR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13459 二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13460 *加壓素原(VP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Preprovasopressin (VP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13461 白介素5受體α(IL5Rα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 5 Receptor Alpha (IL5Ra) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13462 應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1(STIP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Stress Induced Phosphoprotein 1 (STIP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13463 硬脂酰*去飽和酶(SCD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Stearoyl Coenzyme A Desaturase (SCD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13464 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子21(FGF21)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 21 (FGF21) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13465 補(bǔ)體成分4d(C4d)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Component 4d (C4d) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13466 *6(KLK6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kallikrein 6 (KLK6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13467 嗜鉻蛋白B(CHGB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chromogranin B (CHGB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13468 胰島素樣生長(zhǎng)因子酸不穩(wěn)定亞基(IGFALS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein, Acid Labile Subunit (IGFALS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13469 血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Angiotensin II (AngII) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
13470 雙特異性磷酸酶6(DUSP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 6 (DUSP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13471 Nodal同源物(NODAL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nodal Homolog (NODAL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13472 Nei內(nèi)切核酸酶Ⅷ樣蛋白1(NEIL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nei Endonuclease VIII Like Protein 1 (NEIL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13473 黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Melanoma Cell Adhesion Molecule (MCAM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13474 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 3 (TGFb3) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5綿羊主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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