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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-02-07 02:25:22瀏覽次數(shù):391次
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綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
13397 載脂蛋白F(APOF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Apolipoprotein F (APOF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13398 5羥色胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SERT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13399 全*合酶(HCCS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Holocytochrome C Synthase (HCCS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13400 *脫羧酶1(GAD1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamate Decarboxylase 1, Brain (GAD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13401 Cerberus蛋白(CER)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cerberus (CER) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13402 *合成酶(GS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13403 cGMP依賴性蛋白激酶Ⅰ(PRKG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase, cGMP Dependent Type I (PRKG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13404 胞質(zhì)分裂作用因子3(DOCK3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dedicator Of Cytokinesis 3 (DOCK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13405 輸出蛋白5(XPO5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Exportin 5 (XPO5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13406 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 7 (IGFBP7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13407 性別決定區(qū)Y框蛋白9(SOX9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 9 (SOX9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13408 驅(qū)動(dòng)蛋白家族成員20A(KIF20A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kinesin Family, Member 20A (KIF20A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13409 含IQ基元GTP酶激活蛋白2(IQGAP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for IQ Motif Containing GTPase Activating Protein 2 (IQGAP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13410 酸性葡糖苷酶α(GαA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucosidase Alpha, Acid (GaA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13411 Podocin蛋白(PDCN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Podocin (PDCN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13412 激肽原1(KNG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kininogen 1 (KNG1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13413 腫瘤壞死因子配體超家族成員4(TNFSF4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 4 (TNFSF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13414 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leukocyte Immunoglobulin Like Receptor Subfamily B, Member 4 (LILRB4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13415 細(xì)胞粘附分子1(CADM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cell Adhesion Molecule 1 (CADM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13416 核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lamin A/C (LMNA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13417 肝配蛋白B受體3(EPHB3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ephrin Type B Receptor 3 (EPHB3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13418 醛脫氫酶3家族成員A1(ALDH3A1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 3 Family, Member A1 (ALDH3A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13419 轉(zhuǎn)化受體電位陽(yáng)離子通道亞家族M成員4(TRPM4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transient Receptor Potential Cation Channel Subfamily M, Member 4 (TRPM4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13420 Klothoβ蛋白(KLβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Klotho Beta (KLb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13421 多配體蛋白聚糖3(SDC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Syndecan 3 (SDC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13422 乳腺癌抗雌激素藥物耐藥性基因1(BCAR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Breast Cancer Anti Estrogen Resistance 1 (BCAR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13423 肌微管素相關(guān)蛋白9(MTMR9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myotubularin Related Protein 9 (MTMR9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13424 皮膚橋蛋白(DPT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dermatopontin (DPT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13425 雙腎上腺皮質(zhì)激素(DCX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Doublecortin (DCX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13426 *豐富糖蛋白(HRG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histidine Rich Glycoprotein (HRG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13427 含MOCO硫化酶羧基端域蛋白1(MOSC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for MOCO Sulphurase C-Terminal Domain Containing Protein 1 (MOSC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13428 含MANSC域蛋白1(MANSC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for MANSC Domain Containing Protein 1 (MANSC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13429 利鈉肽受體2(NPR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Natriuretic Peptide Receptor 2 (NPR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13430 碳酸酐酶Ⅳ(CA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase IV (CA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13431 對(duì)氧磷酶3(PON3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Paraoxonase 3 (PON3) 48T/96T Homo sapiens綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒 (Human)
13432 血管非炎性蛋白3(VNN3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vanin 3 (VNN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13433 脂素1(LPIN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lipin 1 (LPIN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5綿羊白介素2(IL-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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