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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
13319 Podocan蛋白(PODN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Podocan (PODN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13320 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10(Grb10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Growth Factor Receptor Bound Protein 10 (Grb10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13321 胰島素樣生長(zhǎng)因子2-mRNA結(jié)合蛋白3(IGF2BP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 mRNA Binding Protein 3 (IGF2BP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13322 黏病毒耐藥蛋白1(MX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myxovirus Resistance 1 (MX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13323 酶原粒蛋白16同源物B(ZG16B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Zymogen Granule Protein 16 Homolog B (ZG16B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13324 甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13325 糖蛋白Ⅴ(GP5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycoprotein V, Plaet (GP5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13326 白介素10受體α(IL10Rα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 10 Receptor Alpha (IL10Ra) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13327 白介素10受體β(IL10Rβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 10 Receptor Beta (IL10Rb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13328 巢蛋白(NID)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nidogen (NID) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13329 靜止素Q6硫基氧化酶1(QSOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Quiescin Q6 Sulfhydryl Oxidase 1 (QSOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13330 連接橋粒斑珠蛋白(JUP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Junction Plakoglobin (JUP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13331 抗增生抗體靶分子1(TAPA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Target Of The Antiproliferative Antibody 1 (TAPA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13332 細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Extracellular Phosphoglycoprotein (MEPE) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13333 *磺基轉(zhuǎn)移酶(PST)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phenol Sulfotransferase (PST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13334 *Ⅶ(F7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Coagulation Factor VII (F7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13335 解整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloprotease 33 (ADAM33) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13336 N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Acetyltransferase 1 (NAT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13337 氯離子通道輔助蛋白1(CLCA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chloride Channel Accessory 1 (CLCA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13338 *肽酶抑制因子Kunitz型2(SPINT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serine Peptidase Inhibitor Kunitz Type 2 (SPINT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13339 NADP依賴性蘋(píng)果酶2(ME2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Malic Enzyme 2, NADP+ Dependent, Mitochondrial (ME2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13340 干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13341 賴氨酰氧化酶樣蛋白2(LOXL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 2 (LOXL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13342 原鈣黏素γA2(PCDHγA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protocadherin Gamma A2 (PCDHgA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13343 賴氨酰氧化酶樣蛋白1(LOXL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase Like Protein 1 (LOXL1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13344 *Ⅶ(F7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Coagulation Factor VII (F7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13345 心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白C(MYBPC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myosin Binding Protein C, Cardiac (MYBPC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13346 UL16結(jié)合蛋白2(ULBP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for UL16 Binding Brotein 2 (ULBP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13347 信號(hào)素4A(SEMA4A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 4A (SEMA4A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13348 Tolloid樣蛋白1(TLL1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tolloid Like Protein 1 (TLL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13349 絡(luò)絲蛋白(RL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Reelin (RL) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13350 *酶(Arg)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Arginase (Arg) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13351 含RNA結(jié)合冷休克域蛋白E1(CSDE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1) 48T/96T Homo sapiens猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒 (Human)
13352 C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13353 *蛋白酶23(PRSS23)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protease, Serine 23 (PRSS23) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13354 巢蛋白2(NID2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nidogen 2 (NID2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5猴子巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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