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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-17 17:16:50瀏覽次數(shù):592次
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猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
13191 核纖層蛋白A/C(LMNA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lamin A/C (LMNA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13192 髓分化因子88(MyD88)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myeloid Differentiation Factor 88 (MyD88) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13193 法尼酯X受體(FXR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Farnesoid X Receptor (FXR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13194 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin I Type 2, Fast Skeletal (TNNI2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13195 趨化因子C-X-C-基元受體7(CXCR7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 7 (CXCR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13196 磷脂酶A2受體1(PLA2R1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phospholipase A2 Receptor 1 (PLA2R1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13197 封閉蛋白11(CLDN11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 11 (CLDN11) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13198 前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Six Transmembrane Epithelial Antigen Of The Prostate 2 (STEAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13199 DNA甲基轉移酶1(DNMT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for DNA Methyltransferase 1 (DNMT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13200 DNA酶Ⅰ樣蛋白3(DNASE1L3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I Like Protein 3 (DNASE1L3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13201 死亡關聯(lián)蛋白激酶1(DAPK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Death Associated Protein Kinase 1 (DAPK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13202 原鈣黏素β16(PCDHβ16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protocadherin Beta 16 (PCDHb16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13203 多聚ADP核糖聚合酶4(PARP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Poly ADP Ribose Polymerase 4 (PARP4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13204 鈣離子轉運ATP酶A2(ATP2A2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Cardiac Muscle, Slow Twitch 2 (ATP2A2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13205 中間α-球蛋白抑制因子H3(ITIH3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H3 (ITIH3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13206 成纖維細胞生長因子15(FGF15)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 15 (FGF15) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13207 叉頭框蛋白O3(FOXO3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Forkhead Box Protein O3 (FOXO3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13208 軟骨關聯(lián)蛋白(CRTAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cartilage Associated Protein (CRTAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13209 扭轉原腸胚形成同源物1(TWSG1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Twisted Gastrulation Protein Homolog 1 (TWSG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13210 端粒酶逆轉錄酶(TERT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for omerase Reverse Transcriptase (TERT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13211 BMP結合內皮調節(jié)因子(BMPER)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for BMP Binding Endothelial Regulator (BMPER) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13212 基質金屬蛋白酶14(MMP14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 14 (MMP14) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13213 BMP結合內皮調節(jié)因子(BMPER)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for BMP Binding Endothelial Regulator (BMPER) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13214 鈣磷蛋白(CAPS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calcyphosine (CAPS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13215 奇異不良素(DYSF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dysferlin (DYSF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13216 補體成分1q子成分樣蛋白1(C1qL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent Like Protein 1 (C1qL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13217 補體成分1q子成分C(C1qC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 1, Q Subcomponent C (C1qC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13218 斯鈣素2(STC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Stanniocalcin 2 (STC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13219 鈣粘蛋白EGF LAG七經G-型受體2(CELSR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin EGF LAG Seven Pass G-Type Receptor 2 (CELSR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13220 氨基己糖苷酶Aα(HEXα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexosaminidase A Alpha (HEXa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13221 抑制素βB(INHβB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibin Beta B (INHbB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13222 羧肽酶A3(CPA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carboxypeptidase A3, Mast Cell (CPA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13223 Slit同源物1(Slit1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Slit Homolog 1 (Slit1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13224 存活素(Surv)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Survivin (Surv) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13225 單核細胞趨化蛋白1(MCP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Monocyte Chemotactic Protein 1 (MCP1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
13226 ATP結合盒轉運蛋白G2(ABCG2)檢測試劑盒猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for ATP Binding Cassette Transporter G2 (ABCG2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13227 骨骼肌特異性受體*激酶(MUSK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Muscle, Skeletal, Receptor Tyrosine Kinase (MUSK) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴白介素6(IL-6)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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