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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-17 18:44:49瀏覽次數(shù):501次
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猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
13111 δ樣蛋白4(δLL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Delta Like Protein 4 (dLL4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13112 含CUB域蛋白1(CDCP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CUB Domain Containing Protein 1 (CDCP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13113 Smad同源物3(Smad3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3 (Smad3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13114 補體因子H相關蛋白3(CFHR3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Factor H Related Protein 3 (CFHR3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13115 角蛋白4(KRT4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Keratin 4 (KRT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13116 ⅩⅣ型膠原(COL14)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type XIV (COL14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13117 雙特異性*磷酸化調節(jié)激酶1A(DYRK1A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dual Specificity Tyrosine Phosphorylation Regulated Kinase 1A (DYRK1A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13118 剪切多聚腺苷酸化特異性因子1(CPSF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cleavage And Polyadenylation Specific Factor 1 (CPSF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13119 Enah/Vasp樣蛋白(EVL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enah/Vasp Like Protein (EVL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13120 趨化因子C-X-C-基元受體4(CXCR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-X-C-Motif Receptor 4 (CXCR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13121 含V-Set域T細胞激活抑制因子1(VTCN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for V-Set Domain Containing T-Cell Activation Inhibitor 1 (VTCN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13122 不均一核核糖核蛋白U(HNRPU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heterogeneous Nuclear Ribonucleoprotein U (HNRPU) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13123 前折疊蛋白亞基1(PFDN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prefoldin Subunit 1 (PFDN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13124 神經(jīng)元衍生孤兒受體1()檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuron Derived Orphan Receptor 1 () 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13125 蝰蛇毒素(Viperin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Viperin 48T/96T Homo sapiens (Human)
13126 亨廷頓蛋白(HTT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Huntingtin (HTT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13127 亨廷頓蛋白(HTT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Huntingtin (HTT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13128 信號素3F(SEMA3F)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semaphorin 3F (SEMA3F) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13129 血管內皮鈣黏蛋白(CDH5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin 5 (CDH5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13130 β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13131 *S轉移酶π1(GSTπ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Pi (GSTp) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
13132 90kDa熱休克蛋白αA1(HSP90αA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock Protein 90kDa Alpha A1 (HSP90aA1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13133 Apelin受體(APLNR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apelin Receptor (APLNR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13134 骨成型蛋白受體1B(BMPR1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein Receptor 1B (BMPR1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13135 乳腺絲抑蛋白(Maspin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Maspin 48T/96T Homo sapiens (Human)
13136 幾丁質酶1(CHIT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chitinase 1 (CHIT1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13137 Zeste同源物增強子2(EZH2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Enhancer Of Zeste Homolog 2 (EZH2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13138 微小染色體維持缺陷蛋白5(MCM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Minichromosome Maintenance Deficient 5 (MCM5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13139 肝配蛋白A4(EFNA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ephrin A4 (EFNA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13140 EB病毒誘導蛋白3(EBI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Epstein Barr Virus Induced Protein 3 (EBI3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13141 前妊娠蛋白關聯(lián)子宮內膜蛋白(PAEP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Progestagen Associated Endometrial Protein (PAEP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13142 淋巴細胞抗原75(LY75)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lymphocyte Antigen 75 (LY75) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13143 CD276分子(CD276)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 276 (CD276) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13144 信號素3E(SEMA3E)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Semaphorin 3E (SEMA3E) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13145 小白蛋白(PVALB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Parvalbumin (PVALB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13146 衰老關鍵蛋白4(FBLN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibulin 4 (FBLN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13147 Sideroflexin 1蛋白(SFXN1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sideroflexin 1 (SFXN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13148 SRC/FGR/YES相關FYN癌基因(FYN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for FYN Oncogene Related To SRC/FGR/YES (FYN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13149 染色質裝配因子1亞基B(CHAF1B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chromatin Assembly Factor 1, Subunit B (CHAF1B) 48T/96T Mus musculus猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒 (Mouse)
13150 氨酰tRNA合成酶復合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aminoacyl tRNA Synthetase Complex Interacting Multifunctional Protein 1 (AIMP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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