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上海紀寧酶聯科技有限公司
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猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
12990 自身免疫調節(jié)因子(AIRE)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Autoimmune Regulator (AIRE) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12991 心肌肌鈣蛋白T(TNNT2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin T Type 2, Cardiac (TNNT2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12992 絨毛膜*α肽(CGα)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chorionic Gonadotropin Alpha Polypeptide (CGa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12993 刺猬因子相互作用蛋白(HHIP)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hedgehog Interacting Protein (HHIP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12994 糖基化磷脂酰肌醇特異性磷脂酶D1(GPLD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Specific Phospholipase D1 (GPLD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12995 免疫球蛋白A1(IgA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin A1 (IgA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12996 免疫球蛋白A2(IgA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin A2 (IgA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12997 D-氨基酸氧化酶激活因子(DAOA)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for D-amino Acid Oxidase Activator (DAOA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12998 無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12999 Discs大同源物4(DLG4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Discs, Large Homolog 4 (DLG4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13000 神經調節(jié)素4(NRG4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuregulin 4 (NRG4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13001 *氨基甲酰轉移酶(OCT)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ornithine Carbamoyl Transferase (OCT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13002 神經調節(jié)素3(NRG3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuregulin 3 (NRG3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13003 無翅型MMTV整合位點家族成員5A(WNT5A)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5A (WNT5A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13004 Ⅰ型膠原α1(COL1α1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 1 (COL1a1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13005 甘露糖受體C1(MRC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 (MRC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13006 甘露糖受體C1(MRC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mannose Receptor C Type 1 (MRC1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13007 胰島素樣蛋白3(INSL3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Protein 3 (INSL3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13008 線粒體轉錄因子A(TFAM)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transcription Factor A, Mitochondrial (TFAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13009 CD19分子(CD19)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 19 (CD19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13010 唾液酸結合Ig樣凝集素2(SIGLEC2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sialic Acid Binding Ig Like Lectin 2 (SIGLEC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13011 胰高血糖素(GC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucagon (GC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13012 B-細胞激活因子(BAFF)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
13013 載脂蛋白A4(APOA4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13014 封閉蛋白3(CLDN3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Claudin 3 (CLDN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13015 磷脂酰肌醇蛋白聚糖1(GPC1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glypican 1 (GPC1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13016 果糖二磷酸醛縮酶C(ALDOC)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aldolase C, Fructose Bisphosphate (ALDOC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13017 雙特異性磷酸酶5(DUSP5)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 5 (DUSP5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13018 高遷移率族AT Hook蛋白1(HMGA1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 1 (HMGA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13019 高遷移率族AT Hook蛋白2(HMGA2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for High Mobility Group AT Hook Protein 2 (HMGA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13020 己糖激酶2(HK2)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hexokinase 2 (HK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13021 蛋白*磷酸酶ⅣA3(PTPⅣA3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Type IVA 3 (PTP4A3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13022 CREB調節(jié)轉錄輔激活因子3(CRTC3)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for CREB Regulated Transcription Coactivator 3 (CRTC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13023 環(huán)指蛋白39(RNF39)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ring Finger Protein 39 (RNF39) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13024 組胺H4受體(HRH4)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histamine Receptor H4 (HRH4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
13025 組胺H4受體(HRH4)檢測試劑盒猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Histamine Receptor H4 (HRH4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
13026 含鋅飄帶域蛋白1(ZNRD1)檢測試劑盒(酶聯免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Zinc Ribbon Domain Containing Protein 1 (ZNRD1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5猴透明質酸(HA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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