猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

12915 *原C(PGC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pepsinogen C (PGC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12916 芳香烴受體(AhR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aryl Hydrocarbon Receptor (AhR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12917 N-甲基-D-天氡氨酸離子能*受體2A(GRIN2A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamate Receptor, Ionotropic, N-Methyl-D-Aspartate 2A (GRIN2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12918 趨化因子C-基元配體2(XCL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chemokine C-Motif Ligand 2 (XCL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12919 羧肽酶A3(CPA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase A3, Mast Cell (CPA3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12920 *三磷酸酶(ITPA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Inosine Triphosphatase (ITPA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12921 Persephin蛋白(PSPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Persephin (PSPN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12922 平足蛋白(PDPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Podoplanin (PDPN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12923 半*豐富血管生成誘導(dǎo)因子61(CYR61)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cysteine Rich Protein, Angiogenic Inducer 61 (CYR61) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12924 羧肽酶A3(CPA3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carboxypeptidase A3, Mast Cell (CPA3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12925 卵泡刺激素受體(FSHR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Follicle Stimulating Hormone Receptor (FSHR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12926 骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Troponin I Type 1, Slow Skeletal (TNNI1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12927 骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I(TNNI1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Troponin I Type 1, Slow Skeletal (TNNI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12928 血小板衍生生長(zhǎng)因子C(PDGFC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor C (PDGFC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12929 *9(KLK9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kallikrein 9 (KLK9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12930 賴氨酰氧化酶(LOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12931 皮膚橋蛋白(DPT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dermatopontin (DPT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12932 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Troponin I Type 2, Fast Skeletal (TNNI2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12933 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Troponin I Type 2, Fast Skeletal (TNNI2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12934 鋅結(jié)合α2-糖蛋白1(αZGP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-2-Glycoprotein 1, Zinc Binding (aZGP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12935 RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12936 RIO激酶1(RIOK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for RIO Kinase 1 (RIOK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12937 惡性腦腫瘤缺失蛋白1(DMBT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deleted In Malignant Brain Tumors 1 (DMBT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12938 鈣調(diào)蛋白樣蛋白3(CALML3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calmodulin Like Protein 3 (CALML3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12939 白介素1α(IL1α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12940 原卟啉原氧化酶(PPOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12941 原卟啉原氧化酶(PPOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12942 *脫羧酶抗酶1(OAZ1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ornithine Decarboxylase Antizyme 1 (OAZ1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12943 再生胰島衍生蛋白3α(REG3α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha (REG3a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12944 橋粒芯膠粘蛋白3(DSC3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Desmocollin 3 (DSC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12945 表皮膜蛋白3(EMP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Epithelial Membrane Protein 3 (EMP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12946 半乳糖-1-磷酸尿苷酰轉(zhuǎn)移酶(GALT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Galactose-1-Phosphate Uridylyltransferase (GALT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12947 腫瘤壞死因子受體超家族成員10A(TNFRSF10A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Receptor Superfamily, Member 10A (TNFRSF10A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12948 血清淀粉樣蛋白A2(SAA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serum Amyloid A2 (SAA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12949 磷酸二酯酶12(PDE12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphodiesterase猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒 12 (PDE12) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12950 S100鈣結(jié)合蛋白A14(S100A14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A14 (S100A14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12951 *原A(PGA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pepsinogen A (PGA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5猴Ⅳ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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