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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
12796 水通道蛋白8(AQP8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aquaporin 8 (AQP8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12797 雙特異性磷酸酶9(DUSP9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dual Specificity Phosphatase 9 (DUSP9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12798 神經(jīng)源性分化蛋白6(NEUROD6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurogenic Differentiation 6 (NEUROD6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12799 血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plaet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12800 血小板反應(yīng)蛋白2(THBS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thrombospondin 2 (THBS2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12801 碳酸酐酶Ⅸ(CA9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Carbonic Anhydrase IX (CA9) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12802 白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12803 磷酸肌醇依賴性蛋白激酶1(PDPK1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phosphoinositide Dependent Protein Kinase 1 (PDPK1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12804 精胺氧化酶(SMOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Spermine Oxidase (SMOX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12805 HtrA*肽酶4(HTRA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for HtrA Serine Peptidase 4 (HTRA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12806 阻抑素(PHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prohibitin (PHB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12807 果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldolase A, Fructose Bisphosphate (ALDOA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12808 Ⅵ型膠原α1(COL6α1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type VI Alpha 1 (COL6a1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12809 果糖二磷酸醛縮酶B(ALDOB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldolase B, Fructose Bisphosphate (ALDOB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12810 果糖二磷酸醛縮酶C(ALDOC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldolase C, Fructose Bisphosphate (ALDOC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12811 *合成酶(GS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12812 肝配蛋白B2(EFNB2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ephrin B2 (EFNB2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12813 溶質(zhì)載體家族30成員8(SLC30A8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Solute Carrier Family 30 Member 8 (SLC30A8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12814 半*豐富蛋白1(CRIP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cysteine Rich Protein 1, Intestinal (CRIP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12815 *合成酶(GS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutamine synthetase (GS) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12816 CD83分子(CD83)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 83 (CD83) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12817 激素敏感性脂肪酶(LIPE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lipase, Hormone Sensitive (LIPE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12818 信號(hào)素7A(SEMA7A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Semaphorin 7A (SEMA7A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12819 亞鐵螯合酶(FECH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ferrochelatase (FECH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12820 N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12821 ⅣD組磷脂酶A2(PLA2G4D)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholipase A2, Group IVD (PLA2G4D) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12822 補(bǔ)體成分5a(C5a)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12823 YY肽(PYY)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Peptide YY (PYY) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12824 線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Superoxide Dismutase 2, Mitochondrial (SOD2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12825 中性鞘磷脂酶(NSMASE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neutral Sphingomyelinase (NSMASE) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12826 沉默調(diào)節(jié)蛋白1(SIRT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sirtuin 1 (SIRT1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12827 沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SIRT3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sirtuin 3 (SIRT3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12828 過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha (PPARgC1a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12829 脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNASE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Deoxyribonuclease I (DNASE1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12830 *乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Choline Acetyltransferase (ChAT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12831 Ⅻ型膠原(COL12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type XII (COL12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12832 低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 6 (LRP6) 48T/96T Homo sapiens駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒 (Human)
12833 尿調(diào)蛋白(UMOD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Uromodulin (UMOD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5駱駝轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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