馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

12709 分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Secreted Frizzled Related Protein 1 (SFRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12710 運(yùn)動(dòng)因子相關(guān)蛋白1(MRP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Motility Related Protein (MRP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12711 骨成型蛋白3(BMP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 3 (BMP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12712 非受體*激酶2(TNK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tyrosine Kinase, Non Receptor 2 (TNK2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12713 封閉蛋白2(CLDN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Claudin 2 (CLDN2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12714 肌鈀蛋白(MYPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myopalladin (MYPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12715 血管非炎性蛋白1(VNN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vanin 1 (VNN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12716 鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶激活因子2A(GUCA2A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Guanylate Cyclase Activator 2A (GUCA2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12717 GM2*激活因子(GM2A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for GM2 Ganglioside Activator (GM2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12718 溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Acid Phosphatase 2, Lysosomal (ACP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12719 溶酶體酸性磷酸酶2(ACP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Acid Phosphatase 2, Lysosomal (ACP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12720 組織蛋白酶D(CTSD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12721 組織蛋白酶D(CTSD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cathepsin D (CTSD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12722 *酶(Arg)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Arginase (Arg) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12723 Discs大同源物4(DLG4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Discs, Large Homolog 4 (DLG4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12724 中性鞘磷脂酶(NSMASE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neutral Sphingomyelinase (NSMASE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12725 抑制素βE(INHβE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Inhibin Beta E (INHbE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12726 DEAD框肽5(DDX5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for DEAD Box Polypeptide 5 (DDX5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12727 乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12728 蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A2 (PDIA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12729 蛋白二硫化物異構(gòu)酶A5(PDIA5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A5 (PDIA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12730 核小體裝配蛋白1樣1(NAP1L1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleosome Assembly Protein 1 Like Protein 1 (NAP1L1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12731 妊娠帶蛋白(PZP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pregnancy Zone Protein (PZP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12732 */*豐富剪接因子2(SRSF2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Serine/Arginine Rich Splicing Factor 2 (SRSF2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12733 醛脫氫酶1家族成員A1(ALDH1A1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member A1 (ALDH1A1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12734 前列腺蛋白類(lèi)脂肪酶B(LIPB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lipophilin B, Prostatein Like (LIPB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12735 β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12736 早老素1(PSEN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Presenilin 1 (PSEN1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12737 血管非炎性蛋白1(VNN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vanin 1 (VNN1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12738 鈣/鈣調(diào)蛋白依賴(lài)性蛋白激酶Ⅱα(CAMK2α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calcium/Calmodulin Dependent Protein Kinase II Alpha (CAMK2a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12739 拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱβ(TOP2β)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Topoisomerase II Beta (TOP2b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12740 再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12741 異連蛋白β(DTNβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dystrobrevin Beta (DTNb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12742 脊椎蛋白1(SPON1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Spondin 1 (SPON1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12743 互聯(lián)蛋白神經(jīng)元中間絲蛋白α(INα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Internexin Neuronal Intermediate Filament Protein Alpha (INa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12744 Lin-28同源物A(LIN28A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lin-28 Homolog A (LIN28A) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12745 組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12746 受磷蛋白(PLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholamban (PLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12747 無(wú)翅型MMTV整合位點(diǎn)家族成員3A(WNT3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A) 48T/96T Homo sapiens馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 (Human)
12748 再生胰島衍生蛋白3γ(REG3γ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 3 Gamma (REG3g) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5馬免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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