馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

12673 肌紅蛋白(MYO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12674 血管細(xì)胞粘附分子1(VCAM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vascular Cell Adhesion Molecule 1 (VCAM1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
12675 Toll樣受體6(TLR6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 6 (TLR6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12676 轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12677 密封蛋白(OCLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Occludin (OCLN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12678 丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Triosephosphate Isomerase 1 (TPI1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12679 主要堿性蛋白(MBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12680 *-4-羥化酶α多肽Ⅰ(P4Hα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide I (P4Ha1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12681 CD5抗原樣蛋白(CD5L)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for CD5 Antigen Like Protein (CD5L) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12682 骨成型蛋白10(BMP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12683 同種異體移植炎癥因子1(AIF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Allograft Inflammatory Factor 1 (AIF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12684 鞘氨醇1磷酸酯受體1(S1PR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sphingosine 1 Phosphate Receptor 1 (S1PR1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12685 分揀蛋白1(SORT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sortilin 1 (SORT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12686 淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2(APLP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Amyloid Beta Precursor Like Protein 2 (APLP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12687 鈣離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶A2(ATP2A2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for ATPase, Ca++ Transporting, Cardiac Muscle, Slow Twitch 2 (ATP2A2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12688 尿調(diào)蛋白(UMOD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Uromodulin (UMOD) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12689 S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12690 S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A9 (S100A9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12691 蛋白Z依賴性蛋白酶抑制因子(ZPI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Z Dependent Protease Inhibitor (ZPI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12692 賴氨酰氧化酶(LOX)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lysyl Oxidase (LOX) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12693 胞裂蛋白6(SEPT6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Septin 6 (SEPT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12694 蛋氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅱα(MAT2α)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Methionine Adenosyltransferase II Alpha (MAT2a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12695 GPI錨定分子樣蛋白(GML)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycosylphosphatidylinositol Anchored Molecule Like Protein (GML) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12696 B-細(xì)胞κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激酶β(IκBKβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Inhibitor Of Kappa-Light Polypeptide Gene Enhancer In B-Cells Kinase Beta (IkBKb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12697 核糖體蛋白L23A(RPL23A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Ribosomal Protein L23A (RPL23A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12698 同線蛋白2(ST2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Syntenin 2 (ST2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12699 Endoglin蛋白(ENG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endoglin (ENG) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12700 CD19分子(CD19)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 19 (CD19) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12701 鉀中間小電導(dǎo)鈣激活通道蛋白亞家族N成員2(KCNN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Potassium Intermediate Small Conductance Calcium Activated Channel Subfamily N, Member 2 (KCNN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12702 白介素1家族成員9(IL1F9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Family, Member 9 (IL1F9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12703 增殖關(guān)聯(lián)蛋白2G4(PA2G4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Proliferation Associated Protein 2G4 (PA2G4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12704 類固醇5α還原酶1(SRD5α1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Steroid 5 Alpha Reductase 1 (SRD5a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12705 膜聯(lián)蛋白A4(ANXA4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Annexin A4 (ANXA4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12706 角蛋白9(KRT9)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Keratin 9 (KRT9) 48T/96T Mus musculus馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)ELISA試劑盒 (Mouse)
12707 多功能蛋白聚糖(VS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Versican (VS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12708 密封蛋白(OCLN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Occludin (OCLN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5馬主要組織相容性復(fù)合體(MHC/ELA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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