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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-23 17:37:11瀏覽次數(shù):455次
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山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
12510 快肌肌鈣蛋白C(TNNC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin C Type 2, Fast (TNNC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12511 彈性蛋白(ELN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Elastin (ELN) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12512 丙酮酸脫氫酶β(PDHβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pyruvate Dehydrogenase Beta (PDHb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12513 賴氨酸t(yī)RNA合成酶(KARS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysyl tRNA Synthetase (KARS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12514 賴氨酸t(yī)RNA合成酶(KARS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysyl tRNA Synthetase (KARS) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12515 酮戊二酸脫氫酶(OGDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxoglutarate Dehydrogenase (OGDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12516 鈣網(wǎng)蛋白(CRT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calreticulin (CRT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12517 CD83分子(CD83)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 83 (CD83) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12518 組織蛋白酶B(CTSB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin B (CTSB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12519 外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶2(ENPP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 2 (ENPP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12520 白介素18結(jié)合蛋白(IL18BP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 Binding Protein (IL18BP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12521 **脂酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12522 支鏈α-酮酸脫氫酶(BCKDK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Branched Chain Alpha-Ketoacid Dehydrogenase Kinase (BCKDK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12523 白介素19(IL19)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 19 (IL19) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12524 花生四烯酸-5-脂加氧酶(ALOX5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Arachidonate-5-Lipoxygenase (ALOX5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12525 血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12526 細胞色素P450氧化還原酶(CPR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 Reductase (CPR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12527 C-型凝集素域家族3成員B(CLEC3B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for C-Type Lectin Domain Family 3, Member B (CLEC3B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12528 神經(jīng)元正五聚蛋白Ⅱ(NPTX2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuronal Pentraxin II (NPTX2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12529 免疫球蛋白G(IgG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin G (IgG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12530 促胰液素(SCT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Secretin (SCT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12531 骨成型蛋白10(BMP10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Bone Morphogenetic Protein 10 (BMP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12532 自身免疫調(diào)節(jié)因子(AIRE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Autoimmune Regulator (AIRE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12533 5羥色胺轉(zhuǎn)運蛋白(SERT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serotonin Transporter (SERT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12534 組織蛋白酶G(CTSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cathepsin G (CTSG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12535 補體成分9(C9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Complement Component 9 (C9) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12536 硬骨素(SOST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sclerostin (SOST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12537 葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Isomerase (GPI) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12538 鐵調(diào)素(Hepc)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hepcidin (Hepc) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12539 頭蛋白(NOG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Noggin (NOG) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12540 神經(jīng)肽FF(NPFF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Neuropeptide FF (NPFF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12541 腎連蛋白(NPNT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nephronectin (NPNT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12542 白介素1受體輔助蛋白(IL1RAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Accessory Protein (IL1RAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12543 髓細胞觸發(fā)受體2(TREM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Triggering Receptor Expressed On Myeloid Cells 2 (TREM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12544 泛素羧基端酯酶L1(UCHL1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin Carboxyl Terminal Hydrolase L1 (UCHL1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12545 HtrA*肽酶1(HTRA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for HtrA Serine Peptidase 1 (HTRA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12546 肉毒堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(CRAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Carnitine Acetyltransferase (CRAT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12547 *肽酶抑制因子Kazal型1(SPINK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Serine Peptidase Inhibitor Kazal Type 1 (SPINK1) 48T/96T Homo sapiens山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒 (Human)
12548 鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calpastatin (CAST) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12549 脯氨酰4-羥化酶α多肽Ⅲ(P4Hα3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prolyl-4-Hydroxylase Alpha Polypeptide III (P4Ha3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5山羊腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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