山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

12268 阿黑皮素原(POMC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Proopiomelanocortin (POMC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12269 *還原酶(GR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutathione Reductase (GR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12270 內(nèi)皮素受體A(ETRA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin Receptor A (ETRA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12271 妊娠相關(guān)血漿蛋白A2(PAPPA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pappalysin 2 (PAPPA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12272 補(bǔ)體成分5a(C5a)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Component 5a (C5a) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12273 乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12274 乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12275 乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
12276 髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12277 髓過(guò)氧化物酶(MPO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myeloperoxidase (MPO) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
12278 蛋白C抑制因子(PCI)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein C Inhibitor (PCI) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12279 脯氨酰羧肽酶(PRCP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prolylcarboxypeptidase (PRCP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12280 衰老關(guān)鍵蛋白5(FBLN5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibulin 5 (FBLN5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12281 纖維蛋白原(FG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
12282 牙本質(zhì)涎磷蛋白(DSPP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dentin Sialophosphoprotein (DSPP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12283 神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Enolase, Neuron Specific (NSE) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12284 *結(jié)合球蛋白(CBG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Corticosteroid Binding Globulin (CBG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12285 腫瘤壞死因子配體超家族成員12(TNFSF12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Ligand Superfamily, Member 12 (TNFSF12) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12286 補(bǔ)體3a(C3a)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Component 3a (C3a) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12287 膜聯(lián)蛋白A6(ANXA6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Annexin A6 (ANXA6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12288 跨膜*蛋白酶2(TMPRSS2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transmembrane Protease, Serine 2 (TMPRSS2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12289 畸胎瘤衍生生長(zhǎng)因子1(TDGF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Teratocarcinoma Derived Growth Factor 1 (TDGF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12290 Ⅹ型膠原(COL10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type X (COL10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12291 拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(*)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Topoisomerase I (*) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12292 *受體1(FOLR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12293 聚集蛋白聚糖(AGC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
12294 B-細(xì)胞激活因子(BAFF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for B-Cell Activating Factor (BAFF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12295 細(xì)胞間粘附分子4(ICAM4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Intercellular Adhesion Molecule 4 (ICAM4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12296 阻抑素(PHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prohibitin (PHB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12297 層粘連蛋白(LN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Laminin (LN) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12298 Ⅲ型前膠原(PCⅢ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Procollagen III (PCIII) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12299 平足蛋白(PDPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Podoplanin (PDPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12300 前梯度蛋白2(AGR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anterior Gradient Protein 2 (AGR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12301 整合素αM(ITGαM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Integrin Alpha M (ITGaM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
12302 存活素(Surv)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Survivin (Surv) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12303 Ⅸ型膠原α1(COL9α1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type IX Alpha 1 (COL9a1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12304 Ⅹ型膠原(COL10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type X (COL10) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12305 Persephin蛋白(PSPN)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Persephin (PSPN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
12306 *(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Islet Cell Antibodies (ICA)山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
12307 *Ⅷ(F8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Coagulation Factor VIII (F8) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
12308 甘露聚糖結(jié)合凝集素關(guān)聯(lián)*蛋白酶1(MASP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mannose Associated Serine Protease 1 (MASP1) 48T/96T Cavia (Guinea pig )

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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