魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在魚磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

11693 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11694 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11695 基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 11 (MMP11) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11696 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11697 白介素18(IL18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11698 白介素18(IL18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11699 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11700 白介素18(IL18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11701 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11702 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11703 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11704 心鈉肽(ANP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Atrial Natriuretic Peptide (ANP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11705 白介素1受體Ⅱ(IL1R2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Type II (IL1R2) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11706 末端補(bǔ)體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Terminal Complement Complex C5b-9 (C5b-9) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11707 神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glial Fibrillary Acidic Protein (GFAP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11708 激活素B(ACVB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activin B (ACVB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11709 Ⅲ型膠原(COL3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Collagen Type III (COL3) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11710 α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11711 α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11712 α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11713 血小板因子4(PF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Factor 4 (PF4) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11714 血小板因子4(PF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Factor 4 (PF4) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11715 血小板因子4(PF4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plaet Factor 4 (PF4) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11716 CD99分子(CD99)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 99 (CD99) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11717 α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11718 α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11719 半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galactosidase Alpha (GLa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11720 半乳糖苷酶α(GLα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Galactosidase Alpha (GLa) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11721 中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(ELA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Elastase 2, Neutrophil (ELA2) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11722 *原A(PGA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pepsinogen A (PGA) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11723 *原A(PGA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pepsinogen A (PGA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11724 *原C(PGC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pepsinogen C (PGC) 48T/96T Chicken (Gallus)
11725 *原C(PGC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Pepsinogen C (PGC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11726 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11727 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11728 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11729 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Chicken (Gallus)
11730 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11731 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11732 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11733 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11734 血管生長素(ANG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11735 白介素1α(IL1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11736 白介素1α(IL1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 1 Alpha (IL1a) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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