魚促黃體激素（LH）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在魚促黃體激素（LH）ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

11650 脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11651 脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adiponectin Receptor 1 (ADIPOR1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11652 甲胎蛋白(αFP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Chicken (Gallus)
11653 甲胎蛋白(αFP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11654 甲胎蛋白(αFP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-Fetoprotein (aFP) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11655 *3(KLK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Kallikrein 3 (KLK3) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11656 血管生長素(ANG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Angiogenin (ANG) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11657 嗅素4(OLFM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11658 鱗狀細(xì)胞癌抗原2(SCCA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Squamous Cell Carcinoma Antigen 2 (SCCA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11659 白介素16(IL16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 16 (IL16) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11660 白介素16(IL16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 16 (IL16) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11661 白介素17(IL17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11662 白介素17(IL17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11663 成纖維細(xì)胞生長因子受體1(FGFR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor Receptor 1 (FGFR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11664 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11665 成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF23)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 23 (FGF23) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11666 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6 (IGFBP6) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11667 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5 (IGFBP5) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11668 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11669 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11670 淋巴細(xì)胞胞漿蛋白1(LCP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lymphocyte Cytosolic Protein 1 (LCP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11671 環(huán)胍氨酸肽(CCP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cyclical Citrullinated Peptide (CCP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11672 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11673 線粒體乙醛脫氫酶(ALDM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Aldehyde Dehydrogenase, Mitochondrial (ALDM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11674 腦型肌酸激酶(CKB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Brain (CKB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11675 胰島素樣生長因子1(IGF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 1 (IGF1) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11676 *4(VD4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vitamin D4 (VD4) 48T/96T General
11677 脂聯(lián)素(ADP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adiponectin (ADP) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11678 內(nèi)脂素(VF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Visfatin (VF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11679 血小板衍生生長因子AA(PDGFAA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plaet Derived Growth Factor AA (PDGFAA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11680 主要堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11681 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11682 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11683 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11684 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11685 磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(GPC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glypican 4 (GPC4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11686 干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interferon Regulatory Factor 3 (IRF3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11687 細(xì)胞外基質(zhì)蛋白1(ECM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Extracellular Matrix Protein 1 (ECM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11688 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11689 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11690 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11691 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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