魚促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在魚促腎上腺皮質(zhì)激素（ACTH）ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

11521 胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11522 胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11523 胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 48T/96T Chicken (Gallus)
11524 胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 (IGF2) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11525 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11526 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11527 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
11528 內(nèi)皮細(xì)胞TEK*激酶(Tie2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11529 內(nèi)皮細(xì)胞TEK*激酶(Tie2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
11530 內(nèi)皮細(xì)胞TEK*激酶(Tie2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11531 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11532 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11533 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11534 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
11535 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Chicken (Gallus)
11536 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11537 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11538 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11539 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11540 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11541 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11542 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
11543 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Chicken (Gallus)
11544 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11545 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11546 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
11547 粘蛋白6(MUC6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mucin 6 (MUC6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11548 突觸足蛋白(SYNPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Synaptopodin (SYNPO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11549 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11550 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 2 (IGFBP2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11551 雙調(diào)蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Amphiregulin (AREG) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11552 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11553 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11554 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Capra hircus; Caprine (Goat)
11555 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Equus caballus; Equine (Horse)
11556 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Chicken (Gallus)
11557 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11558 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
11559 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
11560 窖蛋白(CAV1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caveolin 1 (CAV1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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