倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

11025 接觸蛋白3(CNTN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Contactin 3 (CNTN3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11026 細胞胱硫醚γ裂解酶(CSE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cystathionine Gamma Lyase (CSE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11027 胰島素降解酶(IDE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Degrading Enzyme (IDE) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11028 氧鯊烯環(huán)化酶(OSC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxidosqualene Cyclase (OSC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11029 氧鯊烯環(huán)化酶(OSC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oxidosqualene Cyclase (OSC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11030 α-乳清蛋白(αLA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-Lactalbumin (aLA) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
11031 泛素(Ub)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ubiquitin (Ub) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11032 白介素17(IL17)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 17 (IL17) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
11033 垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(ADCYAP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adenylate Cyclase Activating Polypeptide 1, Pituitary (ADCYAP1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11034 前胰淀粉樣蛋白(ProIAPP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Proislet Amyloid Polypeptide (ProIAPP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11035 干擾素γ誘導(dǎo)蛋白16(IFI16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Gamma Inducible Protein 16 (IFI16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11036 Toll樣受體4(TLR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 4 (TLR4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11037 Toll樣受體2(TLR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Toll Like Receptor 2 (TLR2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
11038 激活素受體樣激酶1(ALK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activin Receptor Like Kinase 1 (ALK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11039 心肌鈣黏蛋白(CDHH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cadherin, Heart (CDHH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11040 纖維膠凝蛋白3(FCN3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ficolin 3 (FCN3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11041 檸檬酸合酶(CS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Citrate Synthase (CS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11042 血小板膜糖蛋白Ⅵ(GP6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glycoprotein VI, Plaet (GP6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11043 白介素7受體(IL7R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 7 Receptor (IL7R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11044 白介素28受體(IL28R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 28 Receptor (IL28R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11045 Ⅱ型膠原交聯(lián)羧基端肽(CTXⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cross Linked C-opeptide Of Type II Collagen (CTXII) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11046 軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11047 纖維膠凝蛋白2(FCN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ficolin 2 (FCN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11048 聚集蛋白聚糖(AGC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Aggrecan (AGC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11049 p53上調(diào)凋亡調(diào)節(jié)因子(PUMA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for p53 Upregulated Modulator Of Apoptosis (PUMA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11050 血小板親和蛋白1(PKP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Plakophilin 1 (PKP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11051 *7(KLK7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Kallikrein 7 (KLK7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11052 S抗原(SAG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for S Antigen (SAG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11053 蛋白激酶Cζ(PKCζ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase C Zeta (PKCz) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11054 白介素5(IL5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 5 (IL5) 48T/96T Cavia (Guinea pig )
11055 尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶4(NOX4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 4 (NOX4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11056 Smad同源物4(Smad4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mothers Against Decapentaplegic Homolog 4 (Smad4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11057 趨化因子C-C-基元受體4(CCR4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 4 (CCR4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11058 血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiopoietin Like Protein 2 (ANGPTL2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11059 干擾素γ誘導(dǎo)單核因子(MIγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Monokine Induced By Interferon Gamma (MIg) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11060 蛋白激酶Cα(PKCα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Kinase C Alpha (PKCa) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
11061 防御素α5(DEFα5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Defensin Alpha 5, Paneth Cell Specific (DEFa5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
11062 *(LZM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Chicken 倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒(Gallus)
11063 煙堿型*受體α4(CHRNα4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Alpha 4 (CHRNa4) 48T/96T Homo sapiens (Human)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5倉鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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