豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

10731 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10732 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 4 (IGFBP4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10733 血管內(nèi)皮生長因子D(VEGFD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor D (VEGFD) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10734 白介素11(IL11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 11 (IL11) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10735 血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10736 白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10737 血管內(nèi)皮生長因子C(VEGFC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor C (VEGFC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10738 白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 12B (IL12B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10739 血管內(nèi)皮生長因子B(VEGFB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10740 白介素12A(IL12A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 12A (IL12A) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10741 血管內(nèi)皮生長因子B(VEGFB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vascular Endothelial Growth Factor B (VEGFB) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10742 *型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase Receptor (uPAR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10743 *型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase Receptor (uPAR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10744 *型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase (uPA) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10745 *型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plasminogen Activator, Urokinase (uPA) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10746 血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thrombopoietin (TPO) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10747 腫瘤壞死因子β(TNFβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tumor Necrosis Factor Beta (TNFb) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10748 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10749 組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 4 (TIMP4) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10750 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10751 組織金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 3 (TIMP3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10752 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10753 組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 2 (TIMP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10754 內(nèi)皮細(xì)胞TEK*激酶(Tie2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TEK Tyrosine Kinase, Endothelial (Tie2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10755 免疫球蛋白樣EGF樣域*激酶1(Tie1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10756 免疫球蛋白樣EGF樣域*激酶1(Tie1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tyrosine Kinase With Immunoglobulin Like And EGF Like Domains Protein 1 (Tie1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10757 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Stromal Cell Derived Factor 1 (SDF1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10758 干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Stem Cell Factor Receptor (SCFR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10759 干細(xì)胞因子受體(SCFR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Stem Cell Factor Receptor (SCFR) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10760 CD40配體(CD40L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 40 Ligand (CD40L) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10761 CD30配體(CD30L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cluster Of Differentiation 30 Ligand (CD30L) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10762 調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Regulated On Activation In Normal T-Cell Expressed And Secreted (RANTES) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10763 胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Placenta Growth Factor (PLGF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10764 胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Placenta Growth Factor (PLGF) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10765 嗅素4(OLFM4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Olfactomedin 4 (OLFM4) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
10766 抑瘤素M(OSM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Oncostatin M (OSM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10767 肌肌酸激酶(CKM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Muscle (CKM) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10768 骨保護(hù)素(OPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteoprotegerin (OPG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10769 膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cholecystokinin A Receptor (CCKAR) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10770 基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10771 基質(zhì)金屬蛋白酶8(MMP8)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 8 (MMP8) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10772 基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10773 基質(zhì)金屬蛋白酶7(MMP7)檢測試劑盒豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 7 (MMP7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10774 基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5豚鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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