豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

10449 趨化因子C-C-基元受體6(CCR6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 6 (CCR6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10450 高分子量激肽原(HMWK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for High Molecular Weight Kininogen (HMWK) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10451 轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transferrin (TRF) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10452 *豐富α2-糖蛋白1(LRG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Leucine Rich Alpha-2-Glycoprotein 1 (LRG1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10453 α2-HS糖蛋白(αHSG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Alpha-2-Heremans Schmid Glycoprotein (aHSG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10454 抑制素B(INHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Inhibin B (INHB) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10455 胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1) 48T/96T Chicken (Gallus)
10456 Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
10457 Ⅰ型膠原α2(COL1α2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 2 (COL1a2) 48T/96T Chicken (Gallus)
10458 *S轉(zhuǎn)移酶α1(GSTα1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glutathione S Transferase Alpha 1 (GSTa1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10459 纖維蛋白原(FG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibrinogen (FG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10460 補(bǔ)體成分2(C2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Complement Component 2 (C2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10461 17-羥孕酮(17-OHP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for 17-Hydroxyprogesterone (17-OHP) 48T/96T General
10462 雌三醇(E3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Estriol (E3) 48T/96T General
10463 雄烯二酮(ASD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Androstenedione (ASD) 48T/96T General
10464 胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caspase 14 (CASP14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10465 胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caspase 14 (CASP14) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10466 胱天蛋白酶14(CASP14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caspase 14 (CASP14) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10467 表睪酮(ET)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Epitestosterone (ET) 48T/96T General
10468 雌二醇(E2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Estradiol (E2) 48T/96T General
10469 1,25-二羥基*3(DHVD3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for 1,25-Dihydroxyvitamin D3 (DHVD3) 48T/96T General
10470 衰變加速因子(DAF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Decay Accelerating Factor (DAF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10471 骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10472 骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10473 骨鈣素(OC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Osteocalcin (OC) 48T/96T Danio rerio (Zebrafish)
10474 降鈣素(CT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calcitonin (CT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10475 降鈣素(CT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calcitonin (CT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10476 降鈣素(CT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Calcitonin (CT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10477 C組著色性干皮病偶聯(lián)因子(XPC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Xeroderma Pigmentosum, Complementation Group C (XPC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10478 甲狀旁腺素受體2(PTHR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Parathyroid Hormone Receptor 2 (PTHR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10479 *受體(VDR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Vitamin D Receptor (VDR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10480 心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10481 肌酸激酶MB同工酶(CKMB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Creatine Kinase MB Isoenzyme (CKMB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10482 肌紅蛋白(MYO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Myoglobin (MYO) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10483 內(nèi)皮素1(EDN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
10484 內(nèi)皮素1(EDN1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin 1 (EDN1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10485 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10486 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10487 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)檢測(cè)試劑盒豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10488 氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide (NT-ProANP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10489 氨基端前心鈉肽(NT-ProANP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for N-Terminal Pro Atrial Natriuretic Peptide (NT-ProANP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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