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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
10368 組蛋白H2A(H2A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histone H2A (H2A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10369 *受體β(GLRβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glycine Receptor Beta (GLRb) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
10370 組蛋白H3(H3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histone H3 (H3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10371 高鐵血紅蛋白還原酶(MHBR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Methemoglobin Reductase (MHBR) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10372 前列腺素E受體3(EP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Prostaglandin E Receptor 3 (EP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10373 抗雙鏈DNA抗體(Anti-dsDNA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Double Stranded DNA Antibody (Anti-dsDNA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10374 組蛋白H4(H4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histone H4 (H4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10375 組織蛋白酶L(CTSL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cathepsin L (CTSL) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10376 載脂蛋白H(APOH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Apolipoprotein H (APOH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10377 干擾素β(IFNβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10378 白介素1受體拮抗劑(IL1RA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Interleukin 1 Receptor Antagonist (IL1RA) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
10379 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4(NCF4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neutrophil Cytosolic Factor 4 (NCF4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10380 多功能肽酶2(LMP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Large Multifunctional Peptidase 2 (LMP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10381 尾加壓素2受體(UTS2R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Urotensin 2 Receptor (UTS2R) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
10382 尾加壓素2受體(UTS2R)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Urotensin 2 Receptor (UTS2R) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
10383 GATA結(jié)合蛋白1(GATA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for GATA Binding Protein 1 (GATA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10384 GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for GATA Binding Protein 2 (GATA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10385 GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for GATA Binding Protein 5 (GATA5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10386 免疫球蛋白E(IgE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Immunoglobulin E (IgE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10387 抗P62抗體(AP62A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-P62 Antibody (AP62A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10388 蛋白激酶抑制因子α(PKIα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase Inhibitor Alpha (PKIa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10389 甲狀腺球蛋白(TG)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thyroglobulin (TG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10390 組蛋白H2B(H2B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Histone H2B (H2B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10391 抗核糖體P蛋白抗體(ARPA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Ribosomal P Protein Antibody (ARPA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10392 蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Protein Kinase Inhibitor Beta (PKIb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10393 TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子1(TAF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for TATA Box Binding Protein Associated Factor 1 (TAF1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10394 尾加壓素2(UST2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Urotensin 2 (UST2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10395 血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(PECAM1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Plaet/Endothelial Cell Adhesion Molecule (PECAM1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10396 抗核糖體抗體(Anti-rRNP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Ribosomal RNP Antibody (Anti-rRNP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10397 和肽素(CPP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Copeptin (CPP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10398 Biopyrrin蛋白(BPn)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Biopyrrin (BPn) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10399 線粒體肌酸激酶1B(CKMT1B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Creatine Kinase, Mitochondrial 1B (CKMT1B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10400 普列克底物蛋白同源物樣域家族A成員2(PHLDA2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Pleckstrin Homology Like Domain Family A, Member 2 (PHLDA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10401 基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10402 肌原纖蛋白2(FBN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibrillin 2 (FBN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10403 粘蛋白17(MUC17)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mucin 17 (MUC17) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10404 性別決定區(qū)Y框蛋白1(SOX1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 1 (SOX1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
10405 性別決定區(qū)Y框蛋白2(SOX2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2) 48T/96T Homo sapiens豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒 (Human)
10406 性別決定區(qū)Y框蛋白3(SOX3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Sex Determining Region Y Box Protein 3 (SOX3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5豚鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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