豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

9939 肌動蛋白束蛋白(FSCN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fascin (FSCN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9940 核糖核酸酶A3(RNASE3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A3 (RNASE3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9941 羥甲基戊二酰*合酶(HMGCS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hydroxymethylglutaryl Coenzyme A Synthase (HMGCS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9942 胰腺再生蛋白Iα(REG1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha (REG1a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9943 抑瘤素M受體(OSMR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Oncostatin M Receptor (OSMR) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9944 抑制素βB(INHβB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Inhibin Beta B (INHbB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9945 細胞色素b-561(CYB561)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome b-561 (CYB561) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9946 主要穹窿蛋白(MVP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Major Vault Protein (MVP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9947 鈣腔蛋白(CALU)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calumenin (CALU) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9948 *α(Amyα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Amylase Alpha (Amya) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9949 白介素2受體α(IL2Rα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Alpha (IL2Ra) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9950 毒蕈堿型*受體M3(CHRM3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Muscarinic 3 (CHRM3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9951 小乳腺表皮粘蛋白(SBEM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Small Breast Epithelial Mucin (SBEM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9952 去氨*加壓素(DDAVP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 1-Desamino 8D Arginine Vasopressin (DDAVP) 48T/96T General
9953 Ⅰ型前膠原氨基端原肽(PⅠNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Procollagen I N-Terminal Propeptide (PINP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9954 半胱氨酰白三烯受體2(CYSLTR2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 2 (CYSLTR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9955 絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶激酶5(MAP4K5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase Kinase 5 (MAP4K5) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9956 樁蛋白(Pax)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Paxillin (Pax) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9957 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Chicken (Gallus)
9958 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9959 巨噬細胞來源趨化因子(MDC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Derived Chemokine (MDC) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9960 巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha (MIP1a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9961 巨噬細胞炎性蛋白1α(MIP1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Alpha (MIP1a) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9962 巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9963 巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP1β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 1 Beta (MIP1b) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9964 胱天蛋白酶11(CASP11)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Caspase 11 (CASP11) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9965 巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9966 巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9967 巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP3α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Alpha (MIP3a) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9968 巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP3β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta (MIP3b) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9969 巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP3β)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta (MIP3b) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9970 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 1 (MMP1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9971 基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 10 (MMP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9972 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 13 (MMP13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9973 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9974 基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 2 (MMP2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9975 基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9976 基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9977 β-血小板球蛋白(βTG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Thromboglobulin (bTG) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9978 β-血小板球蛋白(βTG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Thromboglobulin (bTG) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9979 β-血小板球蛋白(βTG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Thromboglobulin (bTG) 豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒48T/96T Mus musculus (Mouse)
9980 *(VE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Vitamin E (VE) 48T/96T General
9981 組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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