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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-25 10:14:03瀏覽次數(shù):437次
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豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
9810 *(LZM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lysozyme (LZM) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9811 干擾素β(IFNβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Beta (IFNb) 48T/96T Chicken (Gallus)
9812 核糖核酸酶A3(RNASE3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ribonuclease A3 (RNASE3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9813 血管緊張素Ⅱ受體1(AGTR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Angiotensin II Receptor 1 (AGTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9814 主要堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Major Basic Protein (MBP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9815 血管性血友病因子裂解蛋白酶(vWFcp)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Von Willebrand Factor Cleaving Protease (vWFCP) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9816 激活素A受體Ⅰ(ACVR1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Activin A Receptor Type I (ACVR1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9817 白介素6(IL6)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 6 (IL6) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9818 白介素10(IL10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 10 (IL10) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9819 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9820 顆粒酶K(GZMK)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Granzyme K (GZMK) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9821 Ⅲ型前膠原羧基端原肽(PⅢCP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Procollagen III C-Terminal Propeptide (PIIICP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9822 Ⅱ型前膠原羧基端原肽(PⅡCP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Procollagen II C-Terminal Propeptide (PIICP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9823 胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Insulin Like Growth Factor 2 Receptor (IGF2R) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9824 組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Latent Transforming Growth Factor Beta Binding Protein 2 (LTBP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9825 絲裂原激活蛋白激酶激活蛋白激酶3(MAPKAPK3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Activated Protein Kinase 3 (MAPKAPK3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9826 骨骼肌肌動蛋白α1(ACTα1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Actin Alpha 1, Skeletal Muscle (ACTa1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9827 葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3(GLUT3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucose Transporter 3 (GLUT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9828 轉(zhuǎn)化生長因子β刺激蛋白22(TSC22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta Stimulated Protein Clone 22 (TSC22) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9829 前列腺素D合酶(PTGDS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prostaglandin D2 Synthase, Hematopoietic (PTGDS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9830 電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽(ETFβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Electron Transfer Flavoprotein Beta Polypeptide (ETFb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9831 磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphoglycerate Mutase 2, Muscle (PGAM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9832 黑素瘤衍生*拉鏈額外核因子(MLZE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Melanoma Derived Leucine Zipper Extra Nuclear Factor (MLZE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9833 結(jié)蛋白(Des)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Desmin (Des) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9834 煙堿型*受體β1(CHRNβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cholinergic Receptor, Nicotinic, Beta 1 (CHRNb1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9835 心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin I Type 3, Cardiac (TNNI3) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9836 低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
9837 乳鐵傳遞蛋白(LTF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lactoferrin (LTF) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
9838 鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白4(KCC4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Potassium Chloride Cotransporters 4 (KCC4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9839 鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白2(KCC2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Potassium Chloride Cotransporters 2 (KCC2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9840 鉀氯協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白3(KCC3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Potassium Chloride Cotransporters 3 (KCC3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9841 趨化因子C-C-基元受體7(CCR7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Chemokine C-C-Motif Receptor 7 (CCR7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9842 β2-微球蛋白(β2M)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-2-Microglobulin (b2M) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9843 三葉因子3(TFF3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Trefoil Factor 3, Intestinal (TFF3) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9844 肌肉生長抑制素(MSTN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Myostatin (MSTN) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9845 免疫球蛋白超家族成員16(IGSF16)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Immunoglobulin Superfamily, Member 16 (IGSF16) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9846 紅細(xì)胞生成素(EPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Erythropoietin (EPO) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9847 肌鈣蛋白C(TNC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Troponin C (TNC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9848 連環(huán)蛋白β1(CTNNβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Catenin Beta 1 (CTNNb1) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9849 乙酰*(A-CoA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Acetyl Coenzyme A (A-CoA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9850 金屬硫蛋白1(MT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Metallothionein 1 (MT1) 48T/96T Rattus norvegicus豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒 (Rat)
9851 α2-微球蛋白樣蛋白1(α2ML1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-2-Microglobulin Like Protein 1 (a2ML1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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