豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

9552 Preptin蛋白(Preptin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Preptin 48T/96T Homo sapiens (Human)
9553 α1-微球蛋白(α1M)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor (a1M) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9554 α1-微球蛋白(α1M)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor (a1M) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9555 α1-微球蛋白(α1M)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Alpha-1-Microglobulin/Bikunin Precursor (a1M) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9556 鈣調(diào)素(CAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calmodulin (CAM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9557 內(nèi)皮型一氧化氮合酶(NOS3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial (NOS3) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9558 細胞色素P450家族成員2E1(CYP2E1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cytochrome P450 2E1 (CYP2E1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9559 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9560 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9561 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9562 轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transforming Growth Factor Beta 2 (TGFb2) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9563 鈣網(wǎng)蛋白(CRT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Calreticulin (CRT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9564 肽基脯氨酰順反式異構(gòu)酶NIMA相互作用蛋白4(PIN4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptidyl Prolyl Cis/Trans Isomerase NIMA Interacting Protein 4 (PIN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9565 *氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶(OCT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Ornithine Carbamoyl Transferase (OCT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9566 肽基脯氨酰異構(gòu)酶E(PPIE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Peptidylprolyl Isomerase E (PPIE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9567 纖調(diào)蛋白(FMOD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Fibromodulin (FMOD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9568 *脫氫酶(SDH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Sorbitol Dehydrogenase (SDH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9569 基膜聚糖(LUM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Lumican (LUM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9570 蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3(PDIA3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A3 (PDIA3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9571 蛋白二硫化物異構(gòu)酶A2(PDIA2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Disulfide Isomerase A2 (PDIA2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9572 載脂蛋白B100(APOB100)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein B100 (APOB100) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9573 載脂蛋白E(APOE)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein E (APOE) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9574 載脂蛋白A1(APOA1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Apolipoprotein A1 (APOA1) 48T/96T Oryctolagus cuniculus (Rabbit)
9575 白介素2(IL2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 2 (IL2) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
9576 干擾素γ(IFNγ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Gamma (IFNg) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
9577 內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制因子(Vaspin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9578 內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制因子(Vaspin)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Visceral Adipose Tissue Derived Serine Protease Inhibitor (Vaspin) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9579 *原片段F1+2(F1+2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Prothrombin Fragment 1+2 (F1+2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9580 β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9581 次黃嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶1(HPRT1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
9582 葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Glucose 6 Phosphate Dehydrogenase (G6PD) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
9583 *蛋白酶1(PRSS1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protease, Serine 1 (PRSS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9584 磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9585 心磷脂合酶(CLS)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Cardiolipin Synthase (CLS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9586 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9587 白介素2受體β(IL2Rβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 2 Receptor Beta (IL2Rb) 48T/96T Rhesus monkey (Simian)
9588 轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Transcription factor 20 (TCF20) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9589 熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(HSF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Heat Shock Transcription Factor 1 (HSF1) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
9590 白介素18(IL18)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interleukin 18 (IL18) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9591 干擾素α(IFNα)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Interferon Alpha (IFNa) 48T/96T Canis familiaris; Canine (Dog)
9592 蛋白*磷酸酶受體H(PTPRH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for Protein Tyrosine Phosphatase Receptor Type H (PTPRH) 48T/96T Mus musculus豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒 (Mouse)
9593 2,3-二磷酸甘油酸(2,3-BPG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) ELISA Kit for 2,3-Bisphosphoglycerate (2,3-BPG) 48T/96T General

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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