兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

9075 抗絲聚蛋白(AFA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Filaggrin Antibody (AFA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9076 抗利尿激素(ADH)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Antidiuretic Hormone (ADH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9077 抗卵巢抗體(AOAb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Ovarian Antibody (AOAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9078 抗Ⅱ型膠原蛋白抗體(Anti-CⅡAb)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Type II Collagen Antibody (Anti-CIIAb) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9079 153kDa核孔蛋白(NUP153)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 153kDa (NUP153) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9080 絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase 1 (MAP3K1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9081 抗OJ抗體(Anti-OJ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-OJ Antibody 48T/96T Homo sapiens (Human)
9082 抗組蛋白抗體(AHA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Histone Antibody (AHA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9083 磷脂酶A1(PLA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholipase A1 (PLA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9084 133kDa核孔蛋白(NUP133)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 133kDa (NUP133) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9085 纖維蛋白原α(FGα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Fibrinogen Alpha (FGa) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9086 絲裂原激活蛋白激酶8(MAPK8)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase 8 (MAPK8) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9087 155kDa核孔蛋白(NUP155)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 155kDa (NUP155) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
9088 四旋蛋白27(TSPAN27)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Tetraspanin 27 (TSPAN27) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9089 胱天蛋白酶10(CASP10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Caspase 10 (CASP10) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9090 硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2(TBP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Thioredoxin Binding Protein 2 (TBP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9091 發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Dynamin 2 (DNM2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9092 磷脂爬行酶2(PLSCR2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Phospholipid Scramblase 2 (PLSCR2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9093 狼瘡腦抗原(LBA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Lupus Brain Antigen 1 (LBA1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9094 VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for VGF Nerve Growth Factor Inducible (VGF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9095 雄激素誘導(dǎo)蛋白1(AIG1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Androgen Induced Protein 1 (AIG1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9096 214kDa核孔蛋白(NUP214)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 214kDa (NUP214) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9097 免疫抑制酸性蛋白(IAP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Immunosuppressive Acidic Protein (IAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9098 抗內(nèi)因子抗體(AIFA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Anti-Intrinsic Factor Antibody (AIFA) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9099 腦啡肽(ENK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Enkephalin (ENK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9100 低分子量激肽原(LMWK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Low Molecular Weight Kininogen (LMWK) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9101 205kDa核孔蛋白(NUP205)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 205kDa (NUP205) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9102 簇集蛋白(CLU)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Clusterin (CLU) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9103 抗原提呈關(guān)聯(lián)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(TAP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Transporter Associated With Antigen Processing (TAP) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9104 188kDa核孔蛋白(NUP188)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Nucleoporin 188kDa (NUP188) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9105 皮膚T-淋巴細(xì)胞關(guān)聯(lián)抗原(CTAGE)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Cutaneous T-Cell Lymphocyte Associated Antigen (CTAGE) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9106 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Glucose Transporter 1 (GLUT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9107 神經(jīng)激肽B(NKB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurokinin B (NKB) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9108 神經(jīng)降壓素(NT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Neurotensin (NT) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9109 接觸蛋白2(CNTN2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Contactin 2 (CNTN2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9110 腎上腺髓質(zhì)素(ADM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Adrenomedullin (ADM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9111 絲裂原激活蛋白激酶14(MAPK14)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Mitogen Activated Protein Kinase 14 (MAPK14) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9112 生長(zhǎng)激素誘導(dǎo)跨膜蛋白(GHITM)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Growth Hormone Inducible Transmembrane Protein (GHITM) 48T/96T Homo sapiens 兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒(Human)
9113 接觸蛋白4(CNTN4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Contactin 4 (CNTN4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
9114 顆粒酶K(GZMK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ELISA Kit for Granzyme K (GZMK) 48T/96T Mus musculus (Mouse)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5兔子內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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